1樓：匿名使用者
在實驗室中, elisa 測定的洗板方式一般有2種,即手工洗板和洗板機洗板。手工洗板是每次反應溫育後,將反應液吸出或甩幹,然後在板孔中加滿洗液,放置2～3 min後,將洗液吸出或甩幹再在吸水紙上拍幹。重複上述洗滌步驟3～4次,最後在吸水紙上拍幹即可。
手工洗板人為因素比較大,實驗人員必須經驗豐富,洗滌次數要足夠,衝擊力又不要太大,加入的洗液量以剛滿反應孔為限,防止孔口內有遊離酶未能洗淨,同時防止孔與孔之間液體交叉。洗滌結束後扣幹亦非常重要,否則易造成假陽性。每次洗完板後,在吸水紙上輕輕拍幹,拍板時要垂直,避免交叉汙染,用力不能過猛,防止抗原抗體複合物脫離;吸水紙要一次性使用,應使用不易脫落碎屑的吸水紙為宜。
酶結合物不耐乾燥,特別在較高的溫度下更易失活,所以拍乾的反應板應儘量縮短在空氣中暴露的時間,時間越長,吸光度值越低。本實驗中手工洗板未出現假陽性結果,因為筆者是嚴格按照試劑說明書的要求進行操作的。
洗板機洗板是將手工操作改由洗板機進行,人為因素少,速度快,條件恆定,但是使用洗板機洗板的一個特點是,每次洗板後不能拍幹,故有較多的液體殘留,需增加洗板次數來減少這種誤差。洗板機洗板次數越少,假陽性越高,本實驗中,洗板1次,假陽性率高達90%;洗板2次,假陽性率為38%;洗板3次,假陽性率為2%;洗板4～5次,未出現假陽性。洗板次數並非越多越好,太多不但浪費人力、物力,並且也會導致假陰性結果,所以一般試劑盒要求洗板4～5次即可。
洗板機洗板時應經常檢查沖洗頭是否通暢,若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出。為了洗滌效果較好,實驗室可採用機器與人工洗滌相結合的方法,在機器洗滌後再進行人工洗板1～2次,能達到理想的洗滌效果。
綜上所述,在elisa快速法檢驗中,手工法洗板和洗板機洗板沒有本質的差別,只要操作合乎要求,均能得到正確、可靠的結果。
2樓：匿名使用者
手工洗板費時費力，洗板機輕鬆快捷
如何正確進行elisa操作
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