重組菌基因不穩定性的原因有哪些,基因工程菌的遺傳不穩定性機制是什麼,有什麼策略

時間 2021-08-11 17:57:11

1樓:匿名使用者

在長時間的培養過程中,利用重組菌的生物反應器的生產率極大地受到質粒不穩定性的影響。通常將質粒不穩定性分為兩類:一類是結構不穩定性,也就是質粒由於鹼基突變、缺失、插入等引起的遺傳資訊變化;另一類是分離不穩定性,指在細胞**過程中質粒不能分配到子代細胞中,從而使部分子代細胞不帶質粒(即p-細胞)。

在連續和分批培養過程中均能觀察到此兩類現象發生。一般情況下具有質粒的細胞(即p+細胞)需要合成較多的dna、rna和蛋白質,因此其比生長速率低於p-細胞,從而p-細胞一旦形成能較快速地生長繁殖並佔據培養物中的大多數。影響質粒維持的因素有以下幾個:

質粒自身的特徵(大小、拷貝數、基因表達水平、基因表達產物等);宿主的基因型和培養條件(溫度、攪拌、稀釋率等)[2]。

提高重組菌穩定性的方法有以下兩種:一是控制培養條件,如在培養基中加入選擇壓力來抑制p-細胞的生長,常用的選擇壓力有新增抗生素、通過質粒進行營養缺陷型互補等,但是這些培養基在工業上的製備較為不易甚至是被禁止的[2],另外可在兩級連續培養中的各級採用不同的培養條件,如在第一級中培養重組菌,在第二級中使其表達產物.二是採用遺傳學方法,如採用營養缺陷型突變株;在質粒中插入分配位點,以克服分離不穩定性;使用重組缺陷宿主;調節基因表達等

2樓:匿名使用者

密碼子偏好不同,可能存在稀有密碼子,阻礙基因表達。

基因表達產物對宿主有害,細菌在傳代過程中將該基因突變掉可能獲得更大的競爭優勢,從而替換掉目標工程菌。

沒有一種脅迫機制使得細菌必須使用重組的基因進行生存,因此細菌更傾向於表達抗抗生素基因而非外源工程基因。

基因工程菌的遺傳不穩定性機制是什麼,有什麼策略

3樓:晚會個位

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答:基因工程菌的遺傳不穩定性的主要機制是什麼? 28 .

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30. 什麼是高密度發酵?影響

為了提高基因工程菌的質粒穩定性,可採用哪些主要方法

4樓:鵝子野心

可採用的方法:

1.選擇合適的宿主菌

2.選擇合適的載體

3.選擇壓力

4.分階段控制培養

5.控制培養條件

6.固定化

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