pcr迴圈次數是否越多越好 為什麼

時間 2021-08-30 09:11:41

1樓:

當然不是越多越好。

迴圈次數過多,並不會計產物也隨之過度增加。因為再次迴圈都有高溫到低的溫度變化,聚合酶的活性有限,而且一般體系中引物和原料的量也不會是無限**的。

另外迴圈次數過多,產物間可能會形成較為複雜的結構,影響其作為模板的效率,因此迴圈次數不是越多越好,一般pcr反應的迴圈不超過35次。

擴充套件資料pcr的原理

pcr是聚合酶鏈式反應的簡稱,是體外快速擴增特定基因或dna序列最為常用的方法之一。具體過程是將雙鏈dna分子在臨近沸點的溫度下加熱分離成兩條單鏈dna分子,dna聚合酶以單鏈dna為模板並利用反應混合系中的四種脫氧核苷酸合成新生的dna互補鏈。重複這一過程便可使目的dn**段得到大規模擴增。

2樓:匿名使用者

不是的,隨著反應的進行,酶會逐漸失活、dntp等原料會逐漸消耗掉。因此在一定範圍內,隨著反應迴圈數的增加,產物會增多;但超過了就不好了。

一般設定30-35個迴圈就很夠了

3樓:匿名使用者

pcr迴圈次數通常就是30左右。迴圈數太多了,雖然可以一定程度的提高產物量,但是由於反應時間過長,有一些非特異產物的擴增也會相應增加,而且隨著酶的擴增能力下降,合成目標片段的能力也會隨之下降,也可能引起其他的非特異擴增。dntp也會消耗,如果有某一種dntp消耗比較大,後續擴增就難免會引起錯配。

所以如果產物已經足夠用於後續分析,一般都不太會過度延長迴圈次數的。

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