流式細胞分析術的工作原理,流式細胞術的用途是什麼

時間 2023-05-19 21:33:10

流式細胞術的用途是什麼

1樓:匿名使用者

細胞或者其他顆粒狀的物體可以被熒游標記的抗體或者替他熒光染料染色。當這些被標記的物體通過流式細胞儀的時候,鐳射照射,得到不同的激發光。

用途:1. 臨床診斷:比如白血病,淋巴瘤的分型,可以指導**。檢測幹細胞的百分率,可以判斷幹細胞**的效果等等。

2. 實驗研究。根據前面所說的原理。只要可以被染色的,都可以用流式來分析。可以檢查各種抗原的含量。代謝狀態等等。

3. 細胞的分選。最後,根據染色的狀態,可以把不同的細胞篩選出來,進行下一步的研究。

流式細胞術原理

2樓:黑科技

流式細胞術公開課。

會形成鞘液流(鞘液是為了保證細胞在中間形成單個排列的細胞流,因為要保證鐳射覆蓋整個樣本中心流)在外周,樣本流在**的層流狀態,使得樣本僅在軸心。

鐳射照射到樣本流上,鐳射60um寬,20um高(寬高有限,只有樣本流剛好在中間才能保證鐳射能覆蓋樣本流細胞)

樣本流中的細胞表面的熒光抗體受到鐳射的照射以後,會被激發出熒光;

有兩個鏡頭接受熒光訊號,一個是forward scatter-fsc檢測器(前向散射光),另一個是side scatter-ssc側向軸檢測器/熒光訊號檢測器(與鐳射90度)

收集到的光訊號就被光纖傳導到光分離系統中去了,光訊號手機系統的內圈是長通濾片。

中圈和外圈分別是帶通濾片和pmt(啥?)

剛才細胞經過鐳射照射會有四個重疊的光譜,x軸是波長,y軸是強度。

第一步,通過長通濾片,光訊號被切割。

第二步,經過帶通濾片把特定波長的波過濾過來,不符合波長條件的波被反射。

第三步,經過過濾的波,經過pmt轉變成電訊號,pmt元件是電訊號檢測分析系統,左邊是光電轉換膜,上下兩邊有不同的小電極,側邊有電子檢測器,光訊號轉換成電訊號的過程:

光子打到左邊的光電轉換膜上---膜上就會蹦出一個電子,這樣就初步實現了光訊號轉變成電訊號 --電訊號經過不同的電極就會** --電子經過**,電訊號實現級聯放大作用(通過調整電壓可以調整最終的電訊號大小) -檢測器上就會形成一個電脈衝。

表示電脈衝有三個引數:

峰寬+高度+峰下面積a;

常規的一般用峰下面積a來表示。

下面是經過電訊號轉換的訊號強度值,反映了每個熒光訊號的強度;

每一行就是一個細胞,每一行代表一個細胞,每一列的數值784~10229代表每個特定的pmt的熒光訊號強度值;

兩個pmt作為橫縱座標,可以根據熒光強度判定這兩種熒光抗體結合細胞的比例;

一個細胞在軸上就是一個點,每一個點就代表一個細胞的位置,橫縱座標分別代表兩個通道pmt的強度(選取的兩個pmt);

從下圖可以看到黑乎乎的一團代表一種細胞,但具體的數字並不知道,為了彌補這個缺點呢,就出現了密度圖。

細胞越多用不同的顏色(偽色)表示,可以看到紅色中心的細胞最多,外周細胞少。

把密度相等的點畫成一條線。

橫軸代表熒光訊號強度,縱軸代表細胞數量。

流式細胞術散點圖引數中“FSC A”與“FSC H”是什麼意

fsc代表的是forward scatter,這個引數和細胞的大小成正比。a 是area的縮寫,h是height的縮寫。這是機器在記錄訊號時所採用的引數 不顯示在使用者介面,一般在除錯機器的時候可以顯示 每個細胞通過鐳射的時候,機器都會記錄一個波狀訊號 一個拱形的訊號 h就是這個拱的高度 代表的是訊...

流式細胞儀的價格

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流式細胞術檢測細胞吞噬能力的方法有什麼優點

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