求解 蛋白純化中結晶的常用哪幾種方法?他們的使用優勢和劣勢?

時間 2025-07-10 13:00:07

1樓:匿名使用者

分離提純某一種蛋白質時,首先要把蛋白質從組織或細胞中釋放出來並保持原來的天然狀態,不喪失活性。所以要採用適當的方法將組織和細胞破碎。常用的破碎組織細胞的方法有:

1. 機械破碎法。

這種方法是利用機械力的剪下作用,使細胞破碎。常用裝置有,高速組織搗碎機、勻漿器、研缽等。

2. 滲透破碎法。

這種方法是在低滲條件使細胞溶脹而破碎。

3. 反覆凍融法。

生物組織經凍結後,細胞內液結冰膨脹而使細胞脹破。這種方法簡單方便,但要注意那些對溫度變化敏啟巖蘆感的蛋白質不宜採用此法。

4. 超聲波法。

使用超聲波**器使細胞膜上所受張力不均而使細胞破碎。

5. 酶法。

如用溶菌酶破壞微生物細胞等。

二) 蛋白質的抽提。

通常選擇適當的緩衝液溶劑把蛋白質提取出來。抽提所用緩衝液的ph、離子強度、組成成分等條件的選擇應根據欲製備的蛋白質的性質而定。如膜蛋白的抽提,抽提緩衝液中一般要加入表面活性劑(十二烷基磺酸鈉、tritonx-100等),使膜結構破壞,利於蛋白質與膜分離。

在抽提過程中,應注意溫度,避免劇烈攪拌等,以防止蛋白質的變性。

三)蛋白質粗製品的獲得。

選用適當的方法將所要的蛋白質與其它雜蛋白分棗氏離開來。比較方便的有效方法是根據蛋白質溶解度的差異進行的分離。常用的有下列幾種方法:

1. 等電點沉澱法。

不同蛋白質的等電點不同,可用等電點沉澱法使它們相互分離。

2. 鹽析法。

不同蛋白質鹽析所需要的鹽飽和度不同,所以可通過調節鹽濃度將目的蛋白沉澱析出。被鹽析沉澱下來的蛋白質仍保持其天然性質,並能再度溶解而不變性。

3. 有機溶劑沉澱法。

中性有機溶劑如乙醇、丙酮,它們的介電常數比水低。能使大多數球狀蛋白質在水溶液中的溶解度降低,進而從溶液中沉澱出來,因此可用來沉澱蛋白質。此外,有機溶劑會破壞蛋白質表面的水化層,促使蛋白質分子變得不穩定而析出。

由於有機溶劑會使蛋白質變性,使用該法時,要注意在低溫下操作,選擇合悄帶適的有機溶劑濃度。

四)樣品的進一步分離純化。

用等電點沉澱法、鹽析法所得到的蛋白質一般含有其他蛋白質雜質,須進一步分離提純才能得到有一定純度的樣品。常用的純化方法有:凝膠過濾層析、離子交換纖維素層析、親和層析等等。

有時還需要這幾種方法聯合使用才能得到較高純度的蛋白質樣品。

2樓:匿名使用者

鹽xi發,重金屬變性發,電泳法,

蛋白質結晶方法優缺點

3樓:帳號已登出

蛋白質結晶方法優點是沉澱溶液容易改變,缺點在高通量篩選、檢測等場合尤為突出,蛋白質(protein)是生命的物質基礎,是有機大分子,是構成細胞的基本有機物,是生命活動的主要承擔者,沒有蛋白質就沒有生命。

氨基酸是蛋白質的基本組成單位,它是與生命及與各種形式的生命活動緊密聯絡在一起的物質,機體中的每乙個細胞和所有重寬行要組成部分都有蛋白質參與。

蛋白質占人體重量的16%~20%,即乙個60kg重的成年人慎鋒譁其體內約有蛋白質。人體內蛋白質的種類基辯很多,性質、功能各異,但都是由20多種氨基酸按不同比例組合而成的,並在體內不斷進行代謝與更新。

蛋白質是由氨基酸以「脫水縮合」的方式組成的多肽鏈經過盤曲摺疊形成的具有一定空間結構的物質。

結晶純化的實質是什麼

4樓:

摘要。您好,結晶純化的實質是熔化,重結晶是將晶體溶於溶劑或熔融後,又重新從溶液或熔體中結晶的過程。重結晶可以使不純淨的物質獲得純化,或使混合在一起的鹽類彼此分離。

您好,結晶純化的實質是熔化,重結晶是將晶體溶於溶劑或熔融後,又重新從溶液或熔體中結晶的過程。重結晶可以使不純淨的物質獲得純化,或使混合在一起的鹽類彼此分離。

固體有機物在溶劑中的溶解度與溫度有密切關係。一般是溫度公升高,溶解度增大。若把固體溶解在熱的溶劑中達到飽和,冷卻時即由於溶解度降低,溶液變成過飽和而析出晶體。

利用溶劑對被提純物質及雜質的溶解度不同,可以使被提純物質從過飽和溶液中析出。而讓雜質全部或大部分仍留在溶液中(若在溶劑中的溶解度極小,則配成飽和溶液後被過濾除去),從而達到提純目的。

青黴素鉀鹽結晶意義是什麼?

青黴素鉀鹽結晶意義是降低致敏性。

純度越高,致敏的幾率越小。

這是一題簡答題要怎麼。

青黴素鉀鹽結晶意義是降低致敏性,純度越高,致敏的幾率越小。

簡答題字數不在多在於答在點上。

在什麼情況下需要進行溼顆粒的乾燥?用什麼裝置?

完整的題目是什麼。

這是我發給你的這個了。

青黴素鉀能溶於水。青黴素鉀為白色晶體性粉末,無臭或微有特異性臭,有吸溼性。易溶於水,生理鹽水,葡萄糖溶液。水溶液在室溫放置易失效,遇酸,鹼,氧化劑等迅速失效。

這就是青黴素鉀鹽需要保持乾燥的原因。

可以選用無水硫酸銅除水。

謝謝你。小事。

好好學習。這應該是高中題吧。

對未知蛋白進行純化時,通常採用怎樣的純化策略?

5樓:宛蝶仍冬

未知蛋白的純化是一項很複雜的工作。一般來說,在國內,能夠對一種未知蛋白進行純化可以做一篇博士**。

純化方案是由幾種純化方法組成的。

一迅做培般選擇的依據是從抽提液中有效成分和雜質之間理化性質考慮的。如沉澱法是從溶解度。

的差異考慮的;離子交換胡譽層析、凝膠過濾、親和層析分別從電荷、分子量、對配體親和力。

的差異性考慮的。為純化某一有效成分,可選出由兩種或更多種方法組成的方案。一般先選粗放、快速、有利縮小樣品體積和後工序處理的方法;精確、費時、需樣品。

量少的方法後選。在每一純化方案中,畝唯切忌一種方法重複使用。

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