什麼是克隆載體?克隆載體必須滿足那些基本條件

時間 2021-08-30 09:21:20

1樓:庫振國薩林

克隆載體是能夠通過限制性內切酶,將目的dn**段整合進去,並且能夠轉入宿主細胞進行表達的生物dna。

通常採用從病毒、質粒或高等生物細胞中獲取的dna作為克隆載體,在載體上插入合適大小的外源dn**段,並注意不能破壞載體的自我複製性質。將重組後的載體引入到宿主細胞中,並在宿主細胞中大量繁殖。常見的載體有質粒,噬菌粒,酵母人工染色體。

對載體的要求:①能在宿主細胞中複製繁殖,而且最好要有較高的自主複製能力。②容易進入宿主細胞,而且進入效率越高越好。

③容易插入外來核酸片段,插入後不影響其進入宿主細胞和在細胞中的複製。這就要求載體dna上要有合適的限制性核酸內切酶位點。④容易從宿主細胞中分離純化出來,

這才便於重組操作。⑤有容易被識別篩選的標誌,當其進入宿主細胞、或攜帶著外來的核酸序列進入宿主細胞都能容易被辨認和分離出來。

2樓:塞曼雁箕璣

應該是pcr

dna擴充技術吧

條件引物(pcr引物為dn**段,它必須有一個附載入體,給它以形象化的定位,那這個實實在在存在的物質載體就是染色體,染色體就是人體實實在在存在的物質、dntp、模板和緩衝液(其中需要mg2+),大家都知道人體有23對染色體。他們的關係就是基因

染色體關係是

附著!克隆載體,細胞內dna複製的引物為一段rna鏈)、酶基因是有遺傳效應的dn**段。dna是抽象的

什麼是克隆載體?克隆載體必須滿足那些基本條件?

3樓:匿名使用者

克隆載體是能夠通過限制性內切酶,將目的dn**段整合進去,並且能夠轉入宿主細胞進行表達的生物dna。

通常採用從病毒、質粒或高等生物細胞中獲取的dna作為克隆載體,在載體上插入合適大小的外源dn**段,並注意不能破壞載體的自我複製性質。將重組後的載體引入到宿主細胞中,並在宿主細胞中大量繁殖。常見的載體有質粒,噬菌粒,酵母人工染色體。

對載體的要求:①能在宿主細胞中複製繁殖,而且最好要有較高的自主複製能力。②容易進入宿主細胞,而且進入效率越高越好。

③容易插入外來核酸片段,插入後不影響其進入宿主細胞和在細胞中的複製。這就要求載體dna上要有合適的限制性核酸內切酶位點。④容易從宿主細胞中分離純化出來, 這才便於重組操作。

⑤有容易被識別篩選的標誌,當其進入宿主細胞、或攜帶著外來的核酸序列進入宿主細胞都能容易被辨認和分離出來。

何為基因載體,說出那些dna可作為基因的載體.簡述克隆載體應所具備的基本條件 5

4樓:弄墨

基因是有遺傳效應的dn**段。dna是抽象的,它必須有一個附載入體,給它以形象化的定位,那這回個實實在答在存在的物質載體就是染色體,染色體就是人體實實在在存在的物質,大家都知道人體有23對染色體。他們的關係就是基因

克隆載體?應該是pcr dna 擴充技術吧 條件  引物(pcr引物為dn**段,細胞內dna複製的引物為一段rna鏈)、酶、dntp、模板和緩衝液(其中需要mg2+)。

希望對你有幫助~(*^__^*)

基因工程中常用哪兩類克隆載體?舉例說明理想質粒載體應具備什麼條件?

5樓:匿名使用者

質粒載體、bai噬菌體載體

理想du質粒載

體條件:

1. 具zhi有複製起始dao點

2. 具有兩種以上易被檢測的內選擇性標記容3. 在選擇標記上具有多種限制酶的單一切點4. 具有儘可能小的相對分子質量

5. 應屬於鬆弛複製型

6. 應為非傳遞性質粒

理想值粒載體例子:

(一) pbr22質粒載體:

1. 相對分子質量較小

2. 具有一個複製起始點,屬鬆弛複製性載體3. 含四環素抗性和氨苄青黴素抗性基因,便於作為選擇性標記4. 有24種單一限制酶識別位點,有利於檢測重組轉化子(二) puc質粒載體

1. 具有很小的相對分子質量和很高的拷貝數2. 適合用於組織化學方法檢測重組體

3. 具有多克隆位點mcs區段。可使具兩種不同粘性末端的多種外源dn**段無需藉助其它操作而直接定向克隆到puc質粒載體上。

何謂基因克隆載體?基因克隆載體至少具備哪三個條件?常用有哪幾類

6樓:楊風遊

基因載體就是能將基因送入到宿主細胞中的運載體,選擇基因載體的條件為:1:能夠在宿主細胞中複製並穩定的儲存.

2:具有多個表達基因的切點,以便與外源基因拼結.3:

有某些特殊基因,以便進行篩選.

基因克隆載體需要有哪幾個條件?

7樓:封琴瑟煙雨冢

基因工程的上游工程主要是目的基因的製取和無性繁殖。具體地說是從生物體的組織、器官或細胞製取目的基因或者人工合成目的基因,將目的基因與載體的dna拼接,使重組體分子匯入受體細胞,篩選和進行無性繁殖。這個過程可以稱為基因克隆(gene cloning)。

基因克隆是70年代發展起來的一項具有革命性的研究技術,可概括為∶分、切、連、轉、選。最終目的在於通過相應技術手段,將目的基因匯入寄主細胞,在宿主細胞內目的基因被大量的複製。

基因是細胞內dna分子上具有遺傳效應的特定核苷酸序列的總稱,是具有遺傳效應的dna分子片段。基因控制蛋白質合成,是不同物種以及同一物種的不同個體表現出不同的性狀的根本原因,即所謂"種瓜得瓜,種豆得豆","一母生九子,九子各不同"。基因通過dna複製及細胞**把遺傳資訊傳遞給下一代,並通過控制蛋白質的合成使遺傳資訊得到表達。

「分」是指分離製備合格的待操作的dna,包括作為運載體的dna和欲克隆的目的dna。"切"是指用序列特異的限制性內切酶切開載體dna,或者切出目的基因;"連"是指用dna連線酶將目的dna同載體dna連線起來,形成重組的dna分子;"轉"是指通過特殊的方法將重組的dna分子送入宿主細胞中進行復制和擴增;"選"則是從宿主群體中挑選出攜帶有重組dna分子的個體。基因工程技術的兩個最基本的特點是分子水平上的操作和細胞水平上的表達,而分子水平上的操作即是體外重組的過程,實際上是利用工具酶對dna分子進行"外科手術"。

8樓:中國農業出版社

用人工方法取得目的基因的適宜載體,即質粒(一種環狀雙鏈dna)或病毒。

基因克隆載體必須具備三個條件,具有能使外源dn**段插入的克隆位點;能攜帶外源dna進入受體細胞,或遊離在細胞質中進行自我複製,或整合到染色體dna上隨染色體dna的複製而複製;必須具有選擇標記,以便篩選承載外源dna的受體細胞。

目前原核受體細胞的載體主要有細菌質粒(鬆弛型)和λ噬菌體兩類,真核細胞受體的載體主要有sv40病毒(用於動物轉化)和ti質粒(用於植物轉化)。

基因工程中常用哪兩類克隆載體?舉例說明理想質粒載體應具備什麼條件?

9樓:盧勳沃慨

克隆載體(cloning

vector):通常採用從病毒、質粒或高等生物細胞中獲取的dna作為克隆載體,在載體上插入合適大小的外源dn**段,並注意不能破壞載體的自我複製性質。將重組後的載體引入到宿主細胞中,並在宿主細胞中大量繁殖。

常見的載體有質粒,噬菌粒,酵母人工染色體。

分子克隆的載體應具備哪些條件

10樓:阿魯巴星人

必備:1.複製

起始位點:可在工具細胞內進行復制

2.多克隆位點:可插入內外源基因容

可選:3.篩選基因:如抗性或顯色基因,可用於轉化菌種的篩選《基因工程》上的說法是:

1.自主複製性

2.可擴增性

3.可轉移性

4.不相容性

11樓:匿名使用者

自我複製的能力,標記基因

用作克隆載體的理想質粒一般具備哪些特點

12樓:哊點壞

用作克復隆載體的理想質制

粒一般具備下述特點:

①具有鬆馳型

複製子(如cole1),複製子(replicon)是質粒自我增殖所必不可少的基本條件,並可協助維持使每個細胞含有一定數量的質粒拷貝。

②在複製子外存在幾個單一的酶切位點(或多克隆位點),以便目的dn**段插入。

③具有插入失活的篩選標記,理想的質粒載體應具有兩種抗菌素抗性標誌,如氨苄青黴素抗性基因(ampr)和四環素抗性基因(tetr)等,以便從平板中直接篩選陽性重組子。

④分子量相對較小和較高的拷貝數。此外,質粒的缺點是容量較小,一般只能接受小於15kb的外來dna,插入片段過大會導致重組子擴增速度減慢,甚至使插入片段失活。主要是對目的基因克隆,建立dna文庫和cdna文庫,其上有複製子即可。

基因克隆載體需要有哪幾個條件,基因克隆的基本步驟有哪些

封琴瑟煙雨冢 基因工程的上游工程主要是目的基因的製取和無性繁殖。具體地說是從生物體的組織 器官或細胞製取目的基因或者人工合成目的基因,將目的基因與載體的dna拼接,使重組體分子匯入受體細胞,篩選和進行無性繁殖。這個過程可以稱為基因克隆 gene cloning 基因克隆是70年代發展起來的一項具有革...

請問有人知道基因克隆載體中PGEX的特點嗎

pgex特點就是帶有gst標籤,可以增加目的蛋白的溶解度,別的沒什麼特點,屬於大眾型載體,目前也較常使用。你說的沒有表達有沒有做全菌的sds page啊,不管是不是形成包涵體全菌電泳都應該有條帶,至於形不形成包涵體就取決於你的iptg濃度和誘導溫度了,iptg越低,溫度越低可溶性越好,我們曾做過0....

什麼是載體,“載體”是什麼意思?

恨死網戀 是生物上的載體嗎 載體是一種允許和幫助水溶性物質滲入並穿過細胞膜的脂質層而轉移到細胞中去的物質。它是膜上的一種蛋白質,調節著離子主動吸收的一種成分。在膜的一側與離子特異性地結合,形成不穩定載體 離子複合物,然後在膜的另一側把離子釋放出來,而載體又回到原來一側.細胞膜上一定的蛋白質,可以使一...