動物細胞核移植過程中,卵母細胞是怎麼去核的

時間 2021-08-11 18:08:08

1樓:sjx我的命

(1)將cb溶於二甲基亞碸中(dmso),即1mlcb加1mldmso作為母液,4℃可存放三年,使用時以1:100加入培養基中,使其最終濃度為10μg/ml。

(2)培養用的塑料圓板的處理:用無毒的polystyrene塑料圓板,厚度需1~1.5mm大小可隨離心管直徑大小而定,只需比離心管口徑略小1~1.

5mm,圓板兩側要有兩個凹陷以便用鑷子挾取,為了便於圓板的支撐和平衡離心,在離心管中加入一個圓筒狀的塑料墊圈,墊圈高2~2.5cm,周邊厚度為2cm,其外徑應與圓板的大小相當,使其與離心管的口徑略小,在離心管中可方便插入和取出,離心前應先把墊圈投入離心管中,把圓板穩固地扣蓋在墊圈上(令其細胞朝下),然後加入cb液略超過圓板,以浸沒細胞。

離心管可用高壓滅菌,塑料圓板墊圈可用60co輻照,也可用95%酒精浸過夜,取出用無菌蒸餾水漂洗2~3次,用紫外線對其兩面照射20~30分鐘或更長後,即可使用。[1]

脫核程式

(1)用能貼壁生長的單層細胞,取數個塑料圓板置入平皿中,接種已製備好的細胞懸液,置37℃%co2培養。

(2)待細胞形成單層時,在無菌條件下將細胞圓板扣蓋在離心管的墊圈上,令細胞面向下,加入cb(10mg/l)培養基,使其淹沒圓板為宜,為了防止圓板離心時翻轉,在圓板上再放入同直徑的圓柱形垂錘。

(3)有99%細胞的核被脫掉,為防止細胞丟失離心速度不要太高,離心時間不宜太長)。

(4)離心脫核後,沉於管底的為胞核,圓板上的細胞為脫核的胞質體,用pbs漂洗2次,每次1~2分鐘可置入培養液基(不含cb)繼續培養,使細胞恢復原先的正常形態。取出固定染色,也可進行細胞融合及染色質匯入試驗,或將胞膜、胞漿分離進行成分分析,或開展膜結構研究。沉於管底的核,因核周圍仍包有薄層胞質和cb,可採用培養液漂洗1~2次,然後用於融合,或將核中染色質匯入另一新細胞,或吸出塗片,固定,染色,製成標本。[1]

2樓:米炫明芒韶

從卵巢裡排出來的卵細胞實際上是次級卵母細胞,處於第二次減數**的中期。核移植中,所用到的卵母細胞是在mii時期的,也就是細胞經過了第一次減數**,排出第一極體,在受精之前會停留在mii時期,做核移植時,使用顯微注射的針穿透透明帶和細胞膜,找到中期的紡錘體,將其吸出。第一極體不需要吸出,還存在於透明帶中。

3樓:天藍色心

你好,和顯微注射技術一樣,在顯微鏡下吸出來的。如果你是高中的學生,這部分應該是選修三裡的動物細胞工程內容,你問得這個問題是不需要理解和掌握的

4樓:哈喲哈哈哈喲喲

動物自然受精的過程中,本是由卵細胞受精,然後發育成個體,因而卵細胞中包含了發育所需要的基本營養,而卵細胞又是由卵母細胞減數裂而來的,因而卵母細胞中也包含了發育所需要的基本營養,並且還未分化,具有全能性。而核雜交是要改變原有受體動物的遺傳物質,改用供體動物的遺傳物質,因而需要將卵母細胞去核。

5樓:匿名使用者

用細胞核移植技術,將一個細胞核用顯微注射的方法注入另一個細胞裡,,使核供體的基因得到完全複製,被啟用**並發育成新個體。

在動物體細胞核移植中,為什麼要將待去核的卵母細胞培養到減數第二次**中期?

6樓:匿名使用者

卵母細胞培養到減數第二次**中期時,細胞已經成熟,具備受精能力,且卵母細胞具有促進核全能性表達的物質。

卵母細胞是在卵子發生過程中進行減數**的卵原細胞。分為初級卵母細胞、次級卵母細胞和成熟的卵母細胞,它們分別是卵原細胞分化和dna複製**後產生、第一次減數**和第二次減數**的產物。

卵原細胞通過增殖和分化形成初級卵母細胞。一個初級卵母細胞經過減數第一次**形成一個次級卵母細胞和一個極體(第一極體),次級卵母細胞減數第二次**形成一個卵細胞和一個極體(第二極體),最後兩個極體都死亡,只留下卵細胞。

擴充套件資料:

體細胞核移植的過程

1、細胞核的採集和卵母細胞的準備

從供體身體的某一部位上取體細胞,並通過體細胞培養技術對該體細胞進行增殖。

採集卵母細胞,體外培養到減數第二次**中期,通過顯微操作去除卵母細胞中的核,由於減二中期細胞核的位置靠近第一極體,用微型吸管可以一併吸出細胞核和第一極體。

2、細胞促融

將供體細胞注入去核卵母細胞通過電刺激使兩細胞融合,供體細胞進入受體卵母細胞內構建重組胚胎,通過物理或化學方法(如電脈衝、鈣離子載體、乙醇、蛋白酶合成抑制劑等)啟用受體細胞,使其完成細胞**和發育程序。

3、植入**母體

體外完成早期胚胎培養後,將胚胎移植入**母體內,使其繼續發育為新個體。

7樓:王君堯

具有受精能力。含有激發細胞**分化的物質

8樓:寶貝

卵母細胞培養到減數第二次**中期時才具備受精能力,且卵母細胞具有促進核全能性表達的物質

9樓:匿名使用者

那個時候卵子才具有受精能力

10樓:匿名使用者

因為發育到mii中期,此時相對來說卵母細胞已經成熟,具備受精的條件,比如說細胞質裡面含有營養物質等等。

進行動物細胞核移植克隆動物時,常以去核的卵母細胞為受體細胞,為什麼?

11樓:匿名使用者

因為卵母細胞中有些化學物質會刺激細胞的分化,並且能過提供營養物質,還有就是卵母細胞相對來說比較大,操作較其他細胞容易。

12樓:匿名使用者

克隆動物模擬的是動物自然受精生產的過程,在這過程中本身是由卵細胞受精完成,因為裡面有生長髮育所需要的營養,卵細胞是由卵母細胞減數**而來,是單倍體,故而由去核的卵母細胞作為受體細胞最合適。

為什麼細胞核移植過程時,要把受體的卵母細胞核給去除

13樓:鵝子野心

為使核移植的

copy胚胎或動物的遺傳物質全部來自有重要利用價值的動物提供的體細胞,在供體細胞的細胞核移致受體細胞之前,必須將受體細胞的遺傳物質去掉或將其破壞。

細胞核移植技術,就是將供體細胞核移入除去核的卵母細胞中,使後者不經過精子穿透等有性過程即無性繁殖即可被啟用、**並發育成新個體,使得核供體的基因得到完全複製。以供體核的**不同可分為胚細胞核移植與體細胞核移植兩種。細胞核移植,就是將一個細胞核用顯微注射的方法放進另一個細胞裡去。

前者為供體,可以是胚胎的幹細胞核,也可以是體細胞的核。受體大多是動物的卵子。因卵子的體積較大,操作容易,而且通過發育,可以把特徵表現出來,因此細胞核移植技術,主要是用來研究胚胎髮育過程中,細胞核和細胞質的功能,以及二者間的相互關係;**有關遺傳,發育和細胞分化等方面的一些基本理論問題。

14樓:手機使用者

保證克隆動物的遺傳物質最大限度來自優良供體

動物細胞核移植技術是有性生殖嗎,動物體細胞核移植為什麼是無性繁殖

有性生殖是指由親本產生的有性生殖細胞 配子 經過兩性生殖細胞 例如精子和卵細胞 的結合,成為受精卵,再由受精卵發育成為新的個體的生殖方式。動物細胞核移植理論上受體細胞為體細胞的情況下也能實現,不一定非要用卵細胞。那麼,再來看看這個卵細胞,雖然它是經過減數 而來,染色體數目也減少了一半,但是,在實驗過...

在體細胞的細胞核移植到受體卵母細胞之前,為什麼必須先去掉受體卵母細胞的核

1。如果疾病的視線患者高度懷疑或儲存無望確認後,一般應進行眼球摘除。其適應症包括 腫瘤單邊填補了眼睛或視網膜,導致視力無法恢復。雙邊腫瘤和上方有隻有一隻眼睛。位於前房腫瘤。青光眼引起的疼痛 光圈沖洗視力減退。廣泛的雙邊病變是不可能恢復有用視力。其它區域性 效果不佳。患者 持續視力喪失與眼睛的疑似腫瘤...

動物細胞融合,動物細胞融合和雜交的區別

雜交細胞 如果是效應b細胞和骨髓瘤細胞雜交那就叫雜交瘤細胞 動物細胞融合和雜交的區別 雜交一般就是指植物的體細胞雜交,首先原理就不一樣,植物體細胞雜交是細胞的全能性,而動物細胞融合是細胞膜的流動性。再者,細胞融合還需要加滅活的病毒或者血清去誘導。最後培養方法也是不一樣的,動物細胞培養需要進行貼壁生長...