1樓：
條帶變黃這個現象沒有碰到過，什麼叫底部條帶變成黃色，其它條帶呢？有正常的麼？染色分快染和慢染，快染做法是先用染色液進行染色1h左右，如果嫌麻煩就在微波爐里加熱30s，再染30分鐘左右的樣子就可以了，然後進行脫色，1小時內更換三次脫色液，基本就可以清楚的看到條帶了。
慢染是先用脫色液進行15脫色，再在脫色液中加入少量染色液，可以染色過液，這樣做的好處是非常省脫色液。之前什麼固色這些過程我沒采用過，所以沒有進行過對比。不過一般染色應該用r250，g250一般用做蛋白質的定量分析。
這裡介紹了g250和r250的區別。試劑和染料時間久一點沒什麼關係，緩衝液1－2星期重新配製一次，否則tris緩衝液ph值容易變化，會對跑膠結果有影響，具體還有什麼問題可以再討論，因為你給的資訊比較少不好做分析。
2樓：玫瑰_薄荷
貌似固定液時間太短了，一般2h以上
變黃的話可能是蛋白自身有一定的問題，也有可能是配膠時有誤（但概率不大）
脫色時1天要換脫色液2-3次的
緩衝液之類的最好還是現配現用，而且試劑要冷藏。染料應該沒多大關係的。
3樓：
怎麼可能染一夜色，時間太長了。你上網再查查染色的時間吧。
變黃不知為什麼，沒遇到過，但既然底部有條帶，膠體和跑帶應該沒問題吧
westernblot電泳後，為什麼要考馬斯亮藍染色，直接轉膜不行嗎？謝謝！
4樓：匿名使用者
wb的膠用考馬斯亮藍染色，有為了確定你的目的條帶電泳情況目的，還有一個目的，就是跟用麗春紅染摸一樣的作用，看轉膜的效率。也就是看你的目的條帶是否都轉移到你的膜上了。
這步染色完全可以省略，一般都可以用預染marker來進行轉膜觀察，另外考馬斯亮藍與蛋白結合後，很難再去除。
5樓：匡雅霜
可以啊。
一般只是用考馬斯亮藍進行預染，提前看一下粗略的結果，不然等westernblot的結果出來基本要第二天了。所以不染色直接轉膜沒問題。
sds-page電泳遇到的問題。
6樓：匿名使用者
3個方面，電泳儀、緩衝液、膠
電泳儀你可以換一臺好的試一下，如果跑出來還這樣，下一步，如果好了，那麼要麼你設定出了問題，電壓電流什麼的，要麼儀器壞了。。
緩衝液注意ph 以及sds的量，可以換一瓶試一下，比如別人配的...如果還是有問題下一步，如果好了，那麼...呵呵，話說你可以blame天平~~
膠如果配稀了或者沒凝好也可能是彌散的...換塊膠吧....
最後說一下 條帶越跑越寬是必然的，條帶最後終歸會有部分彌散，就看你需要跑多少大小的蛋白，一般120v恆壓65min10%或8%的膠30kda以上都不會太彌散，如果你確實需要分離小蛋白，請使用glycine-sds-page，protocol自己上ncbi搜~~望實驗順利~~
7樓：匿名使用者
有三方面原因：電泳儀、緩衝液、膠
1.電泳儀你可以換一臺好的試一下，如果跑出來還這樣，下一步，如果好了，那麼要麼你設定出了問題，電壓電流什麼的，要麼儀器壞了。。
2.緩衝液注意ph 以及sds的量，可以換一瓶試一下，比如別人配的...如果還是有問題下一步，如果好了，那麼...呵呵，話說你可以blame天平~~
3.膠如果配稀了或者沒凝好也可能是彌散的...換塊膠吧....
8樓：匿名使用者
試一下將開始電壓設較低的值；
配好的分離膠，老化時間加長一些，避免不均勻。。
SDS PAGE蛋白電泳配膠不凝固
我分析原因是過硫酸胺失效，過硫酸氨最好是先用現配，如果怕麻煩而且跑膠的頻率很高的話，那麼用完之後ap要放在4 儲存，一週之後必須新配。另外可以適當的增加temed的量，從5 l提高到8 l並無大礙。如你所說，是不是就是ap失效呢，還有，我強烈建議你複查一邊濃縮膠，分離膠各各buffer的組分是否配製...
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sd敢達pp問題 10000點mb麼？如果是的話不建議買機體，因為現在抽到a機的概率很高，沒必要去用mb買，而且很多a機也可以用設計圖來合成，用mb買不合算。建議用mb買機庫，這遊戲若要長期玩，最好買機庫，2500mb一個。除了機庫外，也可以買代幣，買了代幣去抽幸運扭蛋機，運氣好能抽到s機 飛翼零式...