液相色譜柱嚴重拖尾該如何處理,「高效液相色譜法」主峰拖尾怎麼解決?

時間 2021-09-06 19:20:51

1樓:

出峰快結束的時候又出來一個不全的峰,對於這種情況,很有可能是你的柱子不乾淨,才用梯度洗脫法沖洗柱子。單元泵的話,用幾個不同比例的流動相沖洗柱子,至基線穩定。

色譜柱走出來的峰型拖尾很嚴重,這個有好幾種原因:流動相的比例,如甲醇:水的比例不一樣,出峰時間和拖尾程度不一樣的,還有你的柱型是否和檢測物質匹配。

我經常能遇到流動相的比例不同,分離度差別很大的情況。

拖尾原 因 解決方法

1、篩板阻塞 1、a、反衝色譜柱 b、更換進口篩板 c、更換色譜柱

2、色譜柱塌陷 2、填充色譜柱

3、干擾峰 3、a、使用更長的色譜柱 b、改變流動相或更換色譜柱

4、流動相ph選擇錯誤 4、調整ph值。對於鹼性化合物,低ph值更有利於得到對稱峰

5、樣品與填料表面的溶化點發生反應圖 5、a、加入離子對試劑或鹼性揮發性修飾劑 b、更改色譜柱

f、 早出的峰拖尾程度大於晚出的峰

原 因 解決方法

1、柱外效應 1、a、調整系統連線(使用更短、內徑更小的管路) b、使用小體積的流通池

g、 k』增加時,脫尾更嚴重

原 因 解決方法

1、二級保留效應,反相模式 1、a、加入三乙胺(或鹼性樣品) b、加入乙酸(或酸性樣品) c、加入鹽或緩衝劑(或離子化樣品) d、更換一支柱子

2、二級保留效應,正相模式 2、a、加入三乙胺(或鹼性樣品) b、加入乙酸(或酸性樣品) c、加入水(或多官能團化合物) d、試用另一種方法

3、二級保留效應,離子對 3、加入三乙胺(或鹼性樣品)

h、 酸性或鹼性化合物的峰拖尾

原 因 解決方法

1、緩衝不合適 1、a、使用濃度50-100mm的緩衝液 b、使用pka等於流動相ph值的緩衝液

i、 額外的峰

原 因 解決方法

1、樣品中有其他組份 1、正常

2、前一次進樣的洗脫峰 2、a、增加執行時間或梯度斜率 b、提高流速

3、空位或鬼峰 3、a、檢查流動相是否純淨 b、使用流動相作為樣品溶劑 c、減少進樣體積

2樓:匿名使用者

是一個還是兩個組分?

你試試少點進樣

一個的話就是有干擾了,柱子不乾淨,你試試不打樣 進行走基線看看有沒有這個小峰也就是你說的不完全的峰,如果有就是不乾淨,也可能是固定相有溶解

兩個組分如果還出現這個問題就是分離度不夠了,這個就需要研究一下你的本分析物和流動相的關係了

思路就是這樣

3樓:匿名使用者

換色譜柱,色譜柱極性不對。

液相的話換流動相

「高效液相色譜法」主峰拖尾怎麼解決?

4樓:千葉雅之

能不能把色譜條件說一下。好分析調節什麼。

拖尾拖到什麼程度?峰寬橫跨幾分鐘?測定的是含量還是有關?

一般來說拖尾情況要靠對稱因子判斷,對稱因子最好要小於1.3,但是一般不能大於1.5。而且這個對稱因子通常只適用於含量測定上。

一般拖尾先要檢查色譜柱,色譜柱使用過度就會導致拖尾和岔峰。反衝色譜柱或更換新柱子就可以解決。

另外,樣品的濃度不可以過高,含量測定最好不要超過滿量程的30%-40%。

如果是調整試驗方法,那麼可能性就太多了。有可能調整流動相的酸鹼度,有可能要用離子對試劑掃尾,或者要直接換方法等等。

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