微生物染色的革蘭氏染色要點,微生物染色的革蘭氏染色機制

時間 2021-09-11 22:30:20

1樓:揮刀

1、 待檢菌菌齡應為18-24小時。一般情況下,革蘭氏陰性菌的染色反應較為穩定,不易受菌齡的長短影響;而革蘭氏陽性菌,有的在幼齡時呈陽性,超過24小時可變為陰性。故培養物越陳舊,菌細胞衰老、死亡,則染色常為陰性,造成錯判。

2、 塗片以勻薄為佳,切不可濃厚。過於密集的菌體,因洗脫不勻常呈假陽性。鏡檢革蘭氏染色反應時,要以分散開的細菌著色為準。

塗片後不宜用火焰烤乾,宜自然乾燥;若經火焰固定時,應以不燙手為度,以免菌體受損,致使染色反應不準。

3、 革蘭染色操作的關鍵步驟是對脫色的掌握,脫色時間不足,革蘭氏陰性菌可染成陽性菌;脫色過度,革蘭陽性菌會染成陰性菌。故應注意掌握,以無紫色脫出時立即水洗。脫色時間按塗沫厚薄、塗片含水量多少適當掌握,塗沫厚、塗片含水少(水洗後瀝乾水分)時,脫色時間稍長;塗沫薄、塗片含水量多(未瀝乾)時,脫色時間稍短,在20-30秒內調整。

4、 碘液配製後,應裝在密閉的暗色瓶內儲存。如因儲存不當,部分碘將被揮發或被還原,試液由原來的紅棕色變為淡黃色,以至影響固定甲紫的作用,故不宜再用。

5、 革蘭氏染色能否獲得滿意的結果,與操作者的經驗有很大關係。操作沒有把握或對染液有懷疑時,應以對照菌同時染色。

2樓:北納生物

革蘭氏染色與顯微鏡檢查法

微生物染色的革蘭氏染色機制

3樓:匿名使用者

對細菌細胞壁的詳細分析,為解釋革蘭氏染色的機制提供了較充分的基礎。目前多用物理機制來解釋革蘭氏染色現象。革蘭氏染色結果的差異主要基於細菌細胞壁的構造和化學組分不同。

通過初染和媒染,在細菌細胞膜或原生質體上染上了不溶於水的結晶紫與碘的大分子複合物。g+ 細菌由於細胞壁較厚、肽聚糖含量較高和交聯緊密,故用乙醇洗脫時,肽聚糖層網孔會因脫水而明顯收縮,再加上的g+ 細菌細胞壁基本上不含類脂,故乙醇處理不能在壁上溶出縫隙,因此,結晶紫與碘複合物仍牢牢阻留在其細胞壁內,使其呈現藍紫色。g- 細菌因其細胞壁薄、肽聚糖含量低和交聯鬆散,故遇乙醇後,肽聚糖層網孔不易收縮,加上它的類脂含量高,所以當乙醇將類脂溶解後,在細胞壁上就會出現較大的縫,這樣結晶紫與碘的複合物就極易被溶出細胞壁。

因此,通過乙醇脫色,細胞又呈現無色。這時,再經番紅等紅色染料復染,就使g- 細菌獲得了新的顏色——紅色,而g+ 細菌則仍呈藍紫色(實為紫中帶紅)。?

微生物染色的染色方法

革蘭氏染色法的重要性是什麼?

4樓:桑嬡運昕

革蘭氏染色法不僅用來觀察細菌的形態,而且它還是細菌鑑定的重要方法,

微生物的細胞小且透明,在普通光學顯微鏡下不易識別,必須對它們進行染色,使經染色後的菌體與背景形成明顯的色差,從而能更清楚地觀察到其形態和結構。因此,微生物染色技術是觀察微生物形態結構的重要手段。

革蘭氏染色反應是細菌分類和鑑定的重要性狀。它是2023年由丹麥醫師gram創立的。革蘭氏染色法(gram

stain)不僅能觀察到細菌的形態,而且還可將所有細菌區分為兩大類:染色反應呈藍紫色的稱為革蘭氏陽性細菌,用g+表示;染色反應呈紅色(復染顏色)的稱為革蘭氏陰性細菌,用g-表示。細菌對革蘭氏染色的不同反應,是由於它們細胞壁的成分和結構不同而造成的。

革蘭氏陽性細菌的細胞壁主要是由肽聚糖形成的網狀結構組成的,在染色過程中,當用乙醇處理時,由於脫水而引起網狀結構中的孔徑變小,通透性降低,使結晶紫-碘複合物被保留在細胞內而不易脫色,因此,呈現藍紫色;革蘭氏陰性細菌的細胞壁中肽聚糖含量低,而脂類物質含量高,當用乙醇處理時,脂類物質溶解,細胞壁的通透性增加,使結晶紫-碘複合物易被乙醇抽出而脫色,然後又被染上了復染液(番紅)的顏色,因此呈現紅色。

革蘭氏染色需用四種不同的溶液:鹼性染料(basic

dye)初染液;媒染劑(mordant);脫色劑(decolorising

agent)和復染液(counterstain)。鹼性染料初染液的象在細菌的單染色法基本原理中所述的那樣,而用於革蘭氏染色的初染液一般是結晶紫(crystal

violet)。媒染劑的作用是增加染料和細胞之間的親和性或附著力,即以某種方式幫助染料固定在細胞上,使不易脫落,碘(iodine

)是常用的媒染劑。脫色劑是將被染色的細胞進行脫色,不同型別的細胞脫色反應不同,有的能被脫色,有的則不能,脫色劑常用95%的酒精(ethanol)。復染液也是一種鹼性染料,其顏色不同於初染液,復染的目的是使被脫色的細胞染上不同於初染液的顏色,而未被脫色的細胞仍然保持初染的顏色,而且將細胞區分成g+和g-兩大類群,常用的復染液為番紅

革蘭氏染色在微生物學中有何實踐意義

5樓:藺玉枝簡胭

革蘭氏染色首先能讓菌體染色,從而能通過顯微鏡更好地觀察細菌的形態和特點,區分球菌、桿菌等細菌形態。更重要的是,革蘭氏染色能將細菌分為革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌,為細菌鑑定提供了主體方向,同時,對革蘭氏陰性或陽性菌的**用藥也是不同的。

微生物鑑別染色方法有哪些

革蘭氏染色法在微生物學中有何重要意義

6樓:喵喵喵啊

其重要的臨床意義在於:

1、鑑別細菌

2、選擇藥物

3、與致病性有關:革蘭氏陽性菌能產生外毒素,而內毒素主要是指革蘭氏陰性菌胞壁成分中的脂多糖,兩者的致病作用不同。

革蘭氏染色是用來鑑別細菌的一種方法:這種染色法利用細菌細胞壁上的生物化學性質不同,可將細菌分成兩類,即革蘭氏陽性與革蘭氏陰性。

這一染色方法由丹麥醫生漢斯·克里斯蒂安·革蘭於2023年所發明,最初是用來鑑別肺炎球菌與克雷白氏肺炎菌之間的關係,後推廣為鑑別細菌種類的重要特性之一。

擴充套件資料

革蘭氏染色法的原理:

通過結晶紫初染和碘液媒染後,在細胞壁內形成了不溶於水的結晶紫與碘的複合物,革蘭氏陽性菌由於其細胞壁較厚、肽聚糖網層次較多且交聯緻密,故遇乙醇或丙酮脫色處理時,因失水反而使網孔縮小;

再加上它不含類脂,故乙醇處理不會出現縫隙,因此能把結晶紫與碘複合物牢牢留在壁內,使其仍呈紫色;

而革蘭氏陰性菌因其細胞壁薄、外膜層類脂含量高、肽聚糖層薄且交聯度差,在遇脫色劑後,以類脂為主的外膜迅速溶解,薄而鬆散的肽聚糖網不能阻擋結晶紫與碘複合物的溶出,因此通過乙醇脫色後仍呈無色,再經沙黃等紅色染料復染,就使革蘭氏陰性菌呈紅色。

7樓:廣州雙螺旋基因技術****

革蘭氏染色法是細菌學中廣泛使用的一種鑑別染色法,這種染色法是由一位丹麥醫生漢斯·克里斯蒂安·革蘭(hans christian gram,2023年-2023年)於2023年所發明,最初是用來鑑別肺炎球菌與克雷白氏肺炎菌之間的關係。

未經染色之細菌,由於其與周圍環境折光率差別甚小,故在顯微鏡下極難觀察陽性紫色陰性紅色。染色後細菌與環境形成鮮明對比,可以清楚地觀察到細菌的形態、排列及某些結構特徵,而用以分類鑑定。

其重要的意義在於:1.鑑別細菌,通過革蘭氏染色法可以將細菌分為兩大類2.選擇藥物

3.與致病性有關:革蘭氏陽性菌能產生外毒素,革蘭氏陰性菌能產生內毒素,兩者的致病作用不同。

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