1樓：直到遇見你天蠍
，細菌屬於微生物，和我們人體一樣，其中大多數維持生命特徵需要的元件都是各種肽、有機鹽以及蛋白質結構，它們基本上都是陰離子電荷和非離子。比如我們常用電鏡的染色色基是鹼性染料是因為它是唯一的常見陽離子上染體系，可以迅速和標的物件上染，而像是酸性染料、直接染料和分散染料都是水溶性陰離子染料，無法與陰離子標的物產生共軛吸附——所以我們用的一般都是亞甲基藍、甲基紫或者羅丹明b這樣的陽離子來顯色，它們的另外一個好處是還可以溶於部份有機溶劑中，鹼性染料屬於有機偶氮非鹽結晶，除了**蒸餾水之外，乙醇、丙二醇、丙三醇、dmso、odo等生物實驗常用助劑亦能溶解，對微生物的毒性非常低。塗片固定是必須的，如果bai易滑動和不平將會導致不可預知的觀察錯誤和資料冗餘，這在生物實驗中是絕對不允許的，以上碼字較多，請耐心閱讀（最常見的就是亞甲基藍了，鹼性湖藍bb）。
ps：豆知識，大多數陽離子對生物和人體都是有害的，對細菌、細胞和微生物都具有觸殺作用，多數陽離子鹽是重金屬鹽。
2樓：
哈哈，曾經老師也問過哦！不會是同一個老師吧？！因為塗的細胞沒有固定的話，染液滴上後它會飄動，那在洗染液時細胞不就洗掉了嗎？
注意的就是不要弄死細胞咯！不知道你用什麼方法，如果是用火，那就是不要燒死它們，用載玻片背面靠近火源，過兩次就好。over
塗片後為什麼要進行固定？固定時應注意什麼
革蘭氏染色塗片為什麼要固定，固定時要注意什麼問題
3樓：鬼眼七殺
在革蘭氏染色的後續步驟中需要水洗，電風吹吹乾，固定就是為了在這些步驟時玻片上的菌體不會被沖走或吹走。
要注意的是不宜在火焰上停留太長時間以免造成菌體變形，改變了染色結果，而造成假陰性
塗片後為什麼要進行固定？固定時應注意什麼？
微生物實驗中為什麼細菌在染色前需要固定？
4樓：晴晴
一：殺死細胞，是染料易於著色。
二：使細菌附著於玻片上，不易被水沖掉。
在固定時，是要慢慢晾乾，如果得確要加快速度，可以處於酒精燈火焰上部遠處稍微烘幾下，切忌烘得玻片升溫，否則有可能會破壞細菌生命形態
細菌的革蘭氏染色與顯微觀察
一、 實驗原理
革蘭氏染色原理：細菌對於革蘭氏染色的不同反應，是由於它們細胞壁的成分和結構不同造成的。革蘭氏陽性細菌的細胞壁主要是由肽聚糖形成的網狀結，當用乙醇處理時，由於脫水而引發網狀結構的孔徑變小，通透性降低，從而使結晶紫-碘的複合物不易被洗脫而保留在細胞內，經脫色和復染後仍保留初染劑的藍紫色。
革蘭氏陰性菌的細胞壁肽聚糖層較薄、類脂含量高，所以當脫色處理時，類脂質被乙醇(或丙酮)溶解，細胞壁透性增大，使結晶紫-碘的複合物比較容易被洗脫出來，用復染劑復染後，細胞被染上覆染劑的紅色。 顯微鏡成像原理：現代普通光學顯微鏡利用目鏡和物鏡兩組透鏡系統來放大成像，故又常 被稱為複式顯微鏡。
顯微鏡的光學系統中，物鏡的效能最為關鍵，油鏡的放大倍數最大，對微生物學研究最為重要。在載玻片與鏡頭之間加滴鏡油主要是為了增加照明亮度和增加顯微鏡的解析度。以油代替空氣作為光的傳播介質，減少光線的折射或全反射，使觀察到的像更加清晰。
二、 實驗器材
1. 菌落：
大腸桿菌24h營養瓊脂斜面培養物、
金黃色葡萄球菌約24h營養瓊脂斜面培養物、 枯草芽孢桿菌12～18h營養瓊脂斜面培養物。
2. 溶液或試劑：
蒸餾水、碘液、結晶紫染色液、95%酒精、番紅染色液、香柏油。 3. 儀器：
顯微鏡、載玻片、接種環、酒精燈、鑷子、擦鏡紙。
三、 實驗步驟
革蘭氏染色：
1. 塗片
取出載玻片，點燃載玻片，燃盡載玻片上的酒精和滅菌，在中間輕輕點一小滴蒸餾水，用接種環在試管的斜面培養基上，輕輕挑取少量菌體，整個過程試管口都要處在酒精燈的上方，而且速度要快，以防汙染培養基。然後在載玻片的小水滴以轉圈的動作塗片，待水滴混濁後停住，等其乾燥、固定。
2. 初染
滴加結晶紫(以剛好將菌膜覆蓋為宜)於菌落上，染色1～2min ，傾去染色液，有細水從載玻片上方向下衝洗，至洗出液為無色，將載玻片上水甩淨。
3. 媒染
滴加碘液衝去殘水，並覆蓋約1min，水洗。
4. 脫色
將載玻片上面的水甩淨，將載玻片傾斜，在白色背景下，用滴管加95%的酒精脫色，直至流出的酒精剛好不出現藍色，立即用水衝淨酒精，將載玻片上水甩淨。
5. 復染
用番紅液復染約1～2min，水洗，然後再吸水紙吸乾
6. 鏡檢：
在低倍鏡下尋找要觀察的細菌菌落（在不停地移動載玻片，若感覺到有紅色陰影，立刻停止，調整倍數，若不是菌落，繼續找），將鏡筒升高，然後轉換到油鏡。在樣品區域加滴香柏油，用粗調節器將鏡筒小心地降下，使油鏡浸在鏡油中並幾乎與標本相接。將聚光器升至最高位置並開足光圈，用粗調節器將鏡筒徐徐上升，直至視野中出現物像並用細調節器使其清晰準焦為止。
革蘭氏染色： 2.塗片後為何要固定，固定要注意\什麼 3.說明是革蘭氏染色。染色過程要注意什麼。 4.用油鏡
5樓：
防止沖洗掉。手持玻片一端，使塗面朝上，通過微火2—3次。在火上固定時，用手觸控塗片反面，以不燙為宜，不可使載片在火上烤，以免細菌形態被毀壞。
時間的掌控，塗片的均勻，沖洗是防止汙染，傾斜沖洗
先低倍鏡，高倍鏡，在油鏡，塗油少量，二甲苯清洗玻片，油鏡
為何細菌在染色前要先進行固定
6樓：匿名使用者
染完色要用水把多餘的染料衝乾淨，不固定的話就被水一起沖走了，在火焰上來回過兩三下就哦了
7樓：匿名使用者
如果不固定,染片過程中菌膜容易脫落
。。。嗯
革蘭氏染色塗片為什麼要固定
8樓：匿名使用者
染色之前要將滴有菌種的載玻片通過微火烘乾固定，便於染色和觀察
9樓：匿名使用者
原因有三：1固定細菌，防止沖掉2變形蛋白易染色3殺死細菌，防止感染
10樓：匿名使用者
如不固定，後來用流水沖洗就被沖走了
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