1樓:匿名使用者
點樣。用打孔器把濾紙製成直徑2公釐的小源殲園片,隨後把小園片戳附在小號縫衣針的針尖。
上,其大頭部叢敬分固定在軟木塞上,用微量注射器吸取酒樣和配製的標準溶液,緩慢地點。
加在小園濾紙片上,邊點加邊用吹風機以100℃以上的熱風把點樣吹乾。
在活化並經過冷卻的薄層板上,用縫衣針的大頭把矽膠薄層摳掉一小孔,直徑略小。
於2公釐,在滲裂慎小孔中用少許澱粉漿糊,把點加的酒樣或標準溶液的濾紙片粘附於小孔上。
希望對你有所幫助!
薄層色譜法的操作步驟及注意事項
2樓:惠企百科
薄層色譜法的操作步驟及注意事項如下:
1、薄層板點樣後,應待溶劑揮發完,再放人室中。
2、應密閉,展距一般為8~15cm。薄層板放入室時,劑不能沒過樣點。一般情況下,劑浸入薄層下端的高度不宜超過。
3、劑每次後,都需要換,不能重複使用。
4、後的薄層板用適當的方法,使溶劑揮發完全,然後進行檢視。
5、rf值一般控制在,當rf值很大或很小時,應適當改變流動相的比例。
注意事項:鋪板用的勻漿不宜過稠或過稀:過稠,板容易出現拖動或停頓造成的層紋;過稀,水蒸發後,板表面較粗糙勻漿配比般是矽膠g:水=1:2~3,矽膠g:羧甲基纖維素鈉。
水溶液=1:2。研磨勻漿的時間,根據經驗來定,與空氣溼度。
有關,一般通過拿起研棒時勻漿下滴的情況來判斷,越稠越難下滴。勻漿的稀稠除影響板的平滑外,也影響板塗層的厚度,進一步影響上樣量。塗層薄,點樣易過載;塗層厚,顯色不那麼明顯。
通常,板的質量對薄層鑑別的影響不是很,影響最大的是劑的配製和系統的飽和。
薄層色譜實驗步驟
3樓:天府
薄層色譜實驗步驟如下:
1、將1份固定相和3份水在研缽中向一方向研磨混合,去除表面的泡後,倒入塗布器中,在玻璃板上平穩地移動塗布器進行塗布(厚度為至公釐)。
2、取下塗好薄層的玻璃板,置水平臺上於室溫下晾乾,後在110攝氏度烘30分鐘。即置有乾燥劑的乾燥箱中備用。使用前檢查其均勻度(可通過透射光和反射光檢視)。
3、用點樣器點樣於薄層板上,一般為圓點,點樣基線距底邊釐公尺,點樣直徑為2到4公釐,點間距離約為到公釐,點間距離可視斑點擴散情況以不影響檢出為宜。點樣時必須注意勿損傷薄層表面。
4、將點好樣品的薄層板放入室的劑中,浸入劑的深度為距薄層板底邊到釐公尺(切勿將樣點浸入劑中),密封室蓋,等至規定距離(一般為10到15釐公尺)。
5、取出薄層板,晾乾,按各品種項下的規定檢測,如需用薄層掃瞄器對色譜斑點作掃瞄檢出,或直接在薄層上對色譜斑點作掃瞄定量,則可用薄層掃瞄法。
薄層色譜法點樣應注意些什麼
4樓:姜珘
薄層色譜法點樣應注意:點樣點儘可能集中,面積恆定,點樣量準確。
點樣是薄層色譜分析的重要環節,也是最費時間的乙個環節,尤其是在定量路層色譜分析中,點樣所需要的時間要佔整個分析時間的30一60%。因此,有必要使點樣技術最佳化。
總的要求是點樣點儘可能集中,面積恆定,點樣量準確。點樣技術的選擇通常和樣品體積、路層型別、分析目的(定性還是定量)、扮森形式等有關。應選用適宜的點樣器。
定容的微量吸移管比較方便,微量注射器(針頭密平)或定體積毛細管點樣器也可以。位置可在裝有量尺的特製點樣板上雹缺談確定,也可自行測量。
薄層色譜法:
薄層色譜,或稱薄層層析(thin—layer chromatography),是以塗布於支援板上的源碰支援物作為固定相,以合適的溶劑為流動相,對混合樣品進行分離、鑑定和定量的一種層析分離技術。
是將適宜的固定相塗布於玻璃板、塑料或鋁基片上,成一均勻薄層。待點樣、後,根據比移值(rf)與適宜的對照物按同法所得的色譜圖的比移值(rf)作對比,用以進行藥品的鑑別、雜質檢查或含量測定的方法。薄層色譜法是快速分離和定性分析少量物質的一種很重要的實驗技術,也用於跟蹤反應程序。
薄層色譜實驗時不慎將斑點浸入到劑中,會產生什麼影響?
5樓:天堂笑丶譐踃
斑點溶解,不會再跑板。
劑若浸泡到了樣點,則樣品會溶解在劑中,實驗失敗。
由於液麵的不同位置表面張力不同,紙條接近液麵時,其邊緣的表面的張力較大,層析液沿濾紙邊緣擴散過快,而導致色素帶分離不整齊的現象。故而,在插入層析液的濾紙條一端剪去兩個角。
為了防止濾紙條倒入層析液中而使層析實驗失敗。同時,防止因液體表面張力引起層析液沿濾紙條向上的「壁流」而導致色素溶解。
在混合物薄層色譜中,如何判定個各組分在薄層上的位置?
6樓:惠企百科
利用劑判定。分別點樣各組分對照品,用適當的劑混合物,再噴入顯色劑,根據混合物薄層斑點的顏色,確定混合物中的物質,從而判定各組分在薄層上的位置。
根據固定相對各組分的吸附作用或溶解度。
不同的原理。吸附力弱或溶解度小的組分在固定相中分子運動較快,在薄層的上層。吸附力弱或溶解度大的組分在固定相中分子運動較茄氏盯慢,在薄層的下層。
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