如何選用瓊脂糖凝膠電泳時的,如何選用瓊脂糖凝膠電泳時的marker

時間 2021-12-19 16:41:28

1樓:北京索萊寶科技****

如果是核酸marker比較簡單吧,就是看marker條帶的大小和你的目標條帶的關係,儘量選擇目標條帶接近分子量的marker,或是在目標分子量附近條帶較多的marker.

另外就是,如果目標分子量很小,凝膠通常選擇的濃度較大,就不能用分子量太大的marker,例如,只檢測200bp的條帶,那麼用分子量最大到1000,或者500的marker就比較合適.

如果分子量很大,例如在幾k,就可能會選擇向lamda hindiii這樣最大到23k的marker.否則凝膠濃度不合適,marker條帶分不開,影響對你目標分子分子量的判斷.

如何選用瓊脂糖凝膠電泳時的marker?有什麼標準嗎?

2樓:匿名使用者

如果是核酸marker比較簡單吧,就是看marker條帶的大小和你的目標條帶的關係,儘量選擇目標條帶接近分子量的marker,或是在目標分子量附近條帶較多的marker。

另外就是,如果目標分子量很小,凝膠通常選擇的濃度較大,就不能用分子量太大的marker,例如,只檢測200bp的條帶,那麼用分子量最大到1000,或者500的marker就比較合適。

如果分子量很大,例如在幾k,就可能會選擇向lamda hindiii這樣最大到23k的marker。否則凝膠濃度不合適,marker條帶分不開,影響對你目標分子分子量的判斷。

以前我們在實驗室用得最多的是2000,和15000的marker,能覆蓋大部分分子量的檢測。

瓊脂糖凝膠電泳marker的作用

3樓:

瓊脂糖凝膠電泳marker的作用是分子標記。

dna分子標記具有的優越性有:大多數分子標記為共顯性,對隱性性狀的選擇十分便利;基因組變異極其豐富,分子標記的數量幾乎是無限的;在生物發育的不同階段,不同組織的dna都可用於標記分析;分子標記揭示來自dna的變異;

表現為中性,不影響目標性狀的表達,與不良性狀無連鎖;檢測手段簡單、迅速。隨著分子生物學技術的發展,dna分子標記技術已有數十種,廣泛應用於遺傳育種、基因組作圖、基因定位、物種親緣關係鑑別、基因庫構建、基因克隆等方面。

擴充套件資料

標記(marker),染色體上一個可以被識別的區域(比如限制性內切酶的酶切點,基因的位置等)。標記的遺傳能夠被檢測出來。標記可以是染色體上有表達功能的部分(比如基因),也可以是沒有編碼蛋白質功能但遺傳特效能夠被檢測出來的部分。

蛋白marker可分為:

未預染的marker即寬分子量蛋白標準、高分子量蛋白標準以及低分子量蛋白標準;

預染的marker即單色預染和多色預染。

在western blot過程中,分子量marker就像個螺絲釘一樣雖然是個小細節,然而就是這樣一個小細節對實驗結果有著不可忽視的作用。

這個western blot參照家族的一員的作用主要是用來指示蛋白條帶所對應的分子量大小,只有標準量精確無誤,實驗結果才有說服力,除此之外,蛋白標準還有表示轉移成功或者蛋白在凝膠上的電泳程度等等的作用,所以選擇正確的蛋白marker也是western blot實驗成功的必要條件之一。

4樓:之炎彬

你好!所謂「凝膠」是指在一定形狀的制膠容器中所形成的包含電解質的多孔支援介質。當核酸分子位於凝膠的某個部位,在電場作用下,,在電場中核酸分子將從負極向正極移動。

泳動速度取決於dna的大小和構型,dna相對分子質量越大,分子帶電量越小,其電泳的遷移率就越小,反之則越大。

dna電泳一定要使用dna marker或已知大小的正對照dna來估計dn**段大小。所以,在同一個點樣孔中如果有不同大小和構型的dn**段(即marker),電泳後就會在膠片上出現多條不同位置的條帶,這些條帶相當於尺子上的刻度,因此就可以用來測算未知dna樣品的大小。

簡言之,marker就是參照標準。

希望你能理解!

5樓:

你好,瓊脂糖凝膠電泳marker是用來做參考的,類似於標尺的作用。

marker會跑出很多條帶,對應帶的片段長度是一定的(不同的marker,不同,可以查詢);通過找到與樣品平齊的帶,可以間接地判定樣品的片段長度。

這是我個人的理解,不知道描述清楚了沒。

6樓:匿名使用者

樓上都說了marker是判斷dna大小的作用,那我在補充兩個吧,一個是假如樣品電泳沒有出現條帶,可以從marker有沒有跑出來判斷是核酸膠的問題還是樣品的問題,所以marker平時一定要點。還有一種功能也很重要,就是定量,marker中的條帶總的也就分兩種左右的濃度,具體濃度可以問marker**商,電泳後可以根據肉眼直接毛估估dna或rna濃度範圍,還是比較準的,另外也有專門的軟體幫助定量。有必要的話再進行紫外精確定量。

7樓:匿名使用者

可以看到6.50kd 14.3kd 20.

1kd 29.0kd 44.3kd 66.

4kd 97.2kd 116kd 200kd這幾種分子量的蛋白質分佈情況,考染或銀染。

瓊脂糖凝膠電泳marker都有多大的

8樓:北京索萊寶科技****

marker的選擇

dna電泳一定要使用dna marker或已知大小的正對照dna來估計dn**段大小。marker應該選擇在目標片段大小附近ladder較密的,這樣對目標片段大小的估計才比較準確。需要注意的是marker的電泳同樣也要符合dna電泳的操作標準。

如果選擇λdna/hindiii或者λdna/ecori的酶切marker,需要預先65℃加熱5min,冰上冷卻後使用。從而避免hindiii或ecori酶切造成的粘性接頭導致的片段連線不規則或條帶訊號弱等現象。

dna marker分類或分型

λ-ecot14 i digest

λ-hind iii digest

φx174-hae iii digest

φx174-hinc ii digest

dna marker dl2,000

dna marker dl15,000

wide range dna marker (100 - 6,000)

wide range dna marker (500 - 12,000)

wide range dna marker (500 - 15,000)

20 bp dna ladder marker

50 bp dna ladder marker

100 bp dna ladder marker

150 bp dna ladder marker

200 bp dna ladder marker

250 bp dna ladder marker

500 bp dna ladder marker

1 kbp dna ladder marker

supercoiled dna ladder marker

瓊脂糖凝膠電泳marker的作用

瓊脂糖凝膠電泳marker的作用是分子標記。dna分子標記具有的優越性有 大多數分子標記為共顯性,對隱性性狀的選擇十分便利 基因組變異極其豐富,分子標記的數量幾乎是無限的 在生物發育的不同階段,不同組織的dna都可用於標記分析 分子標記揭示來自dna的變異 表現為中性,不影響目標性狀的表達,與不良性...

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dna電泳一般使用的都是瓊脂糖凝膠電泳,電泳的驅動力靠dna骨架本身的負電荷.蛋白質電泳 一般指sds page 一般使用的都是聚丙烯醯胺凝膠電泳,電泳的驅動力靠與蛋白質結合的sds上所攜帶的負電荷.所以相同點就是樣品都是帶負電荷的,從負極向正極移動,移動的距離都和樣品的分子量有關.而且這兩個電泳體...