用質粒做載體將目的基因匯入受體細胞後怎麼辦

時間 2021-08-30 09:50:43

1樓:

質粒匯入受體細胞後就要進行檢測,檢測目的基因有無成功匯入,最後才是表達環節。

作為質粒,必須滿足幾個條件

①能在宿主細胞內複製並穩定地儲存;

②具有多個限制酶切點,以便與外源基因連線;

③具有某些標記基因,便於篩選。

④必須對受體細胞無害。

把重組質粒匯入受體細胞,並沒有整合到受體細胞的dna中去,對受體細胞的基因是沒有影響的。

2樓:匿名使用者

用限制酶和dna內切酶做工具將質粒和目的基因連線,但此時不能破壞標記即應。現在匯入受體細胞。匯入後,話說你怎麼知道導沒匯入,所以用標記基因所表達的性狀來檢驗是否匯入。

現在確定匯入了,就開始培養了噻,就獲得產物了噻,沒別的了。

然後,質粒在受體細胞內複製,對受體細胞肯定有一定影響,畢竟是外來的,但影響很小,相當於多了一點基因,但這沒有什麼用,只當是人家借了你的原料不還罷了。

當然受體細胞的基因肯定是沒變的,因為匯入的質粒沒有整合到細胞原有的dna上面。

好了,就是這樣。望採納

3樓:匿名使用者

目的基因插入受體細胞dna的過程,並沒有改變受體細胞原來的基因的結構,因此不會發生基因突變。這只是基因重組而已,希望樓主可以理解。

4樓:匿名使用者

不會改變受體的基因的,它只是利用受體的酶等等物質表達出蛋白~~

5樓:旋飛風鈴

1.用質粒做載體將目的基因匯入受體細胞後篩選含目的基因的受體細胞

2.合成新的蛋白質

3.不會

6樓:瘋狂之砂

載體可以在受體內通過rna合成需要的蛋白,以達到目的,但不會改變受體基因,因此致病基因並未消失

7樓:匿名使用者

作用:你必須將細胞經過特殊處理才能使其將目的基因表達,產生蛋白質,否則不起作用。肯定會改變細胞基因的

8樓:匿名使用者

分情況討論,如果質粒拷貝數不高(如嚴謹性複製),且外源蛋白表達水平不高,不會對宿主產生嚴重影響,但也容易隨著細胞**而出現「質粒丟失」。如果質粒高拷貝或者質粒裝有強啟動子,胞內外源蛋白的含量會很高(甚至70%),一個是外源蛋白形成包涵體,或者啟動胞內蛋白質降解系統,如蛋白酶體、熱休克蛋白,加速異源蛋白的降解,此時細胞內組成型蛋白(俗稱持家蛋白,即生長必須蛋白)的含量顯著下降,更新速率降低,表觀上就是細胞生長和**受限制。

如果質粒上攜帶有與宿主細胞基因組同源的序列,易發生重組,改變宿主細胞基因組(注意是基因組),當然也有可能使宿主某個(些)基因插入失活,比如我們將質粒插入到組氨酸合成基因中,使重組宿主成為組氨酸突變體,以供陽性篩選。這是基因工程中常見的篩選策略。

完畢,祝好

9樓:善の蟹子

匯入之後就需要測序,看是否倒進去了。

然後看到底有沒有表達。

再之後做分離純化。

帶有目的基因的質粒怎樣匯入受體細胞

10樓:野秀梅實己

細菌質粒上的目的基因不會轉到受體細胞的dna上,只能以質基因形式表達,如果要把目的基因轉到受體細胞的dna分子上,需要把目的基因匯入逆轉錄病毒體內,通過逆轉錄,轉到轉到受體細胞的dna分子上

11樓:

一般利用病毒侵染細菌的原理讓帶有目的基因的質粒匯入受體細胞。

12樓:匿名使用者

1.先加到運載體上:質粒、動植物病毒等

再匯入受體細胞:顯微注射、病毒侵染等方法

2.目的基因匯入受體細胞,需要運輸工具即運載體,如大腸桿菌的質粒。用一種限制性內切酶切斷目的基因和質粒使它們產生相同的粘性末端,在切口加入dna連結酶後,質粒的粘性末端就會與目的基因的粘性末端鹼基互補配對結合,行成重組dna分子,把它匯入受體細胞如細菌、酵母菌,目的基因就能隨受體細胞的繁殖而複製

13樓:匿名使用者

dna連線酶

利用化學或物理的方法誘導如:聚乙二醇

生物方法「滅活的仙台病毒」誘導細胞融合

14樓:匿名使用者

你的受體細胞是什麼?不同種類的細胞方法是不同的,轉化效率也是不同的。所有轉化法都需要先把受體細胞製作成感受態細胞。

最好操作的就是大腸桿菌細胞。可選擇的方法有:熱激法,電穿孔法,化學轉化法等。

酵母:氯化鋰轉化法,電穿孔法,這兩種方法一般需要把環形質粒線性化。

真核細胞:原生質體融合,基因槍法,精子介導法,病毒載體介導法,顯微注射法,花粉管介導法等等。

高中生物選3 質粒是dna分子,作用載體匯入受體細胞後,為什麼目的基因需要啟動子,而標記基因不需要? 40

15樓:匿名使用者

受體細胞一般是原核生物,質粒上基因的表達不存在內含子剪接機制,也不存在基因的組織特異性表達,所以一個啟動子可以啟動所有質粒基因的表達。

16樓:匿名使用者

一個啟動子可以啟動所有質粒基因的表達

17樓:耐庚永恆

書上有寫呀,背下來就好了

基因表達載體的構建與將目的基因匯入受體細胞的區別? 15

18樓:匿名使用者

基因表達載體是一種東西,通常是大腸桿菌,土壤融桿菌等細菌中的dna質粒專,這些質粒作為載體通屬過dna連線酶與目的基因結合。

目的基因匯入受體細胞則是一種過程,指通過顯微注射器或加cacl2改變細胞膜通透性後將目的基因的質粒匯入受體細胞的過程。

基因匯入細胞分兩個過程。

1.目的基因與載體(質粒)結合。

2.將結合了目的基因的載體(質粒)匯入受體細胞。

19樓:楊利平

先解釋一下基因copy表達載體

基因表達載體是指已經插入了目

的基因之後的載體像你所說的 插入目的基因之後的質粒一樣 並不是 所謂的 使目的基因匯入受體細胞 ,使目的基因匯入受體細胞 講的是一個過程

再說兩個短語區別

基因表達載體的構建 就是 相當於重組 質粒 使其加上目的基因目的基因匯入受體細胞 顯然也就是將重組好的質粒放入 受體細胞 使其 表達

發表一下看法 不知道對不對 呵呵 應該是這樣的吧

20樓:匿名使用者

no這兩個是

來不同的概念。構建表達載體源,指的是bai構建一個攜帶目的基因的載du體,通常,zhi我們用ti質粒。

而將目的基因導dao入受體細胞,是指將載體匯入受體細胞,從而讓其表達。這個過程我們有很多方法,比如顯微注射技術,或者cacl2改變通透性後注入。

21樓:破曉的霧

匯入時一回事,表達是另一回事

你匯入了不一定會表達,匯入的目的是使目的基因在回受體內表達出來答。

你必需構建好了載體(終止子,開始子,標記基因....等等),再植入到受體細胞中,從而表達出目的基因所控制的形狀。

為什麼把目的基因匯入受體細胞要用載體?

22樓:魚骨頭愛游泳

要考慮目的基因在細胞中表達,直接匯入目的基因無法表達,沒有表達即轉錄相關的原件,而載體具有!

23樓:123來不及

細胞中外來的dna一般都會被降解掉,而且,就算進到細胞中,還要能複製,能表達才行。載體是自然條件下可以進入細胞,並且能夠複製和表達的dna,所以必需要藉助載體才能進入受體細胞。

pcr只能擴增基因片段,並不能表達,目前還沒有脫離細胞進行的表達過程。

24樓:靜軒散人

首先pcr利用的是dna在不同溫度下的變性和復性,與在細胞中的複製是不一樣的。

*************************===就像你說的,用到質粒的原因實際上就是啟動子,終止子,複製原點和標記基因,如果目的基因上有了他們很可能就不用質粒了,可是目的基因上可能有這些東西都有嗎?

事實上質粒上的啟動子和終止子也是後來做上去的,因為它需要適合受體細胞,能讓受體細胞識別。

25樓:匿名使用者

對的,不一定需要載體。

只要你p出來的片段是完整的,外界條件適當,啟動子響應,啟動子下游的目的基因(orf)就有機會轉錄表達出來。(pcr-->切膠**-->轉化-->篩選) (注意是有機會!機會是否比載體匯入的大,不一定。

)通過載體匯入的好處,一是量產;二是有篩選基因方便挑選transformants;三是方便下游的鑑別。

26樓:匿名使用者

遊離的dna進入細胞體,一般會直接被分解,就算可以進行轉錄——翻譯成蛋白,遊離dna也無法跟著細胞**進行復制,導致子代細胞中不再含有目的基因,也就是說,你費力將基因匯入受體細胞,結果只有一個細胞被改變了,整個群體細胞菌落不會有可觀察的任何變化.

而將基因接入載體,由於載體可以在細胞內複製,隨著細胞**,載體會帶著目的基因存在於每個子代細胞中,最終整個菌落髮生可以觀察到的變化,基因工程才有意義.

基因工程是一個巨集觀提取——微觀改造——巨集觀檢驗的過程,就是依靠各種載體實現的

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