在基因表達構建載體中什麼切割質粒什麼切割目的基因,為什麼

時間 2021-09-04 06:48:27

1樓:墨漪薊憐南

識別序列有區別--g↓gatcc--限制酶1,2都可以切,但是--↓gatc--只能有酶2切。懂了麼,就是說酶一要識別出6個鹼基這樣的排序才能切,但是酶二只需要識別出4個這樣的排序,酶二的選擇性比較低。然後,請給我題目裡的那張圖~是否在標記基因中存在gatc的序列呢,如果有,酶二會去把他切斷,所以就會破壞標記基因了。

求採納為滿意回答。

2樓:匿名使用者

質粒是一個閉合的dna圓圈,你得先切開它,把它切成一條線;然後你再從一長串dna上切下你要的目的片段,用連線酶像膠水一樣,吧質粒的兩端和目的片段的兩端連線起來——又成一個圓圈了,但是這次這個dna圓圈已經含有你要的片段了。

由於載體質粒只有圓圈狀才有活性,才有用,所以你必須這麼做。。。

3樓:x思念de季節

同種限制性內切酶

為了讓他們產生相同的末端

方便重組

4樓:匿名使用者

切割質粒的時候,一般強調的是用同種限制性內切酶,目的是為了產生相同的粘性末端。

但有的時候為了防止目的基因和目的基因相連線,載體和載體相連線,有的時候,我們用兩種限制性內切酶來切割,可以防止這種情況的出現,而獲得目的基因和載體連線物。

5樓:倚欄悼月

同種限制性核酸內切酶

在構建基因表達載體時,常用兩種不同的限制酶切割目的基因和質粒,獲得不同的粘性末端,其主要目的是

6樓:匿名使用者

(1)用限制酶切割dna後,可能產生黏性末端,也可能產生平口末端.若要在限制酶基因工程中,往往採用同種限制酶切割目的基因和質粒以產生相同的黏性末端,再用dna連線酶使其直接進行連線.(2)rna聚合酶識別和結合的部位是啟動子.將目的基因導

根據所學內容回答下列問題:(1)在構建基因表達載體時,可用一種或者多種限制酶進行切割.為了避免目的

7樓:°妝雪雪

(1)在構建基因表達載體時,可用一種或者多種限制酶進行切割.為了避免目的基因和載體在酶切後產生的末端發生任意連線,一般選用兩種限制酶分別對目的基因、運載體進行切割.

(2)在動物細胞培養時,通常在合成培養基中加入適量血清,補充合成培養基中缺乏的物質.細胞培養應在含co2的恆溫培養箱中進行,co2的作用是維持培養液ph.

(3)為了防止動物細胞培養過程中細菌的汙染,可向培養液中加入適量的抗生素.

故答案為:

(1)兩       目的基因、質粒(運載體)(2)血清       維持培養液ph

(3)抗生素

基因工程中,為什麼切質粒和切目的基因要用同種限制酶?

8樓:訾藤軒

''用同種限制酶說明質粒裡面也有和目的基因一樣的基因'' 這樣說是不正確的。

限制酶識別的是鹼基對序列的順序而不是“基因種類”。

用同樣的限制酶處理目的基因和質粒是為了產生相同的粘性末端,以便可以將兩者連線起來(原理是:鹼基對互補配對)。

9樓:匿名使用者

好吧,咱先從啥是基因開始說起吧。目前我們普遍所說的基因是隻具有功能的dna序列,所以並不是所有的dna序列都能叫基因。

然後我們再討論你的問題

樓上的人已經解釋的很清楚了,用同一種限制酶的目的就是讓質粒和目的基因方便連線。為此,甚至人為的在目的基因兩頭加上酶切所需的限制酶識別切割序列(酶切位點),以方便切割。這樣將目的基因和質粒連線後,就方便了後續的實驗研究需要(如大量擴增的需要,蛋白的表達等)。

10樓:準姿梅影

同種限制酶切識別某一種特定的鹼基序列,酶切後不同的質粒和目的基因可以獲得相同的粘性末端,便於質粒和目的基因相連線。

11樓:匿名使用者

質粒裡面含有一段人為新增的多克隆位點,用於多種內切酶的識別,目的基因通常是從cdna上pcr下來的,在設計pcr引物的時候會在前後加上所需的內切酶識別序列,這樣用同樣的內切酶處理質粒和目的基因後,就可以在兩端留下互補的粘性末端,再用連線酶處理就可以把目的基因連到質粒上

12樓:匿名使用者

用同種限制酶不能說明質粒裡面也有和目的基因一樣的基因

注意,限制酶只是作用於特定的酶切點,而基因是dna分子上的片段

13樓:左方十二山

質粒存在於細胞質,但是相對於細胞核,質粒所含的dna較少,所以在質粒中能提取到的目的基因很少,甚至可能沒有,畢竟質粒中只含有少量的dn**段。

而且,相比細胞核,質粒的體積很小,在基因工程中,作業難度較大。

生物 構建基因表達載體時 若只用一種限制酶切割目的

14樓:

因為目的基因、載體兩端均為相同黏性末端,所以目的基因、切後質粒均能自身首尾相連成環。另外一種就是正常的連線。

15樓:

其實很簡單:把目的基因記作a,載體記作b。那麼,由於他們的粘性末端都相同,那麼當他們重新結合時,由於沒有辦法區分,那麼就可能aa結合,bb結合或ab結合

16樓:林蕾

就是說因為他們的末端相同,所以可以隨機組合       紅的為目的基因,藍的為載體

任何基因表達載體的構建都是一樣的,沒有差別.對嗎?原因是什麼,高中知識解答,謝謝

17樓:匿名使用者

不全對bai

。目的基因,啟動子,du終止子,標記基zhi

因,酶等有dao可能不同。步驟相似。

基因表專達載體的構建(即目屬的基因與運載體結合)是實施基因工程的第二步,也是基因工程的核心。

將目的基因與運載體結合的過程,實際上是不同**的dna重新組合的過程。如果以質粒作為運載體,

首先要用一定的限制酶切割質粒,使質粒出現一個缺口,露出黏性末端。然後用同

一種限制酶切斷目的基因,使其產生相同的黏性末端(部分限制性內切酶可切割出平末端,擁有相同效果)。將切下的目的基因的片段插入質粒的切口處,首先鹼基互補配對結合,兩個黏性末端吻合在一起,鹼基之間形成氫鍵,再加入適量dna連線酶,催化兩條dna鏈之間形成磷酸二酯鍵,從而將相鄰的脫氧核糖核酸連線起來,形成一個重組dna分子。如人的胰島素基因就是通過這種方法與大腸桿菌中的質粒dna分子結合,形成重組dna分子(也叫重組質粒)的。

如何構建能高效表達目的基因的表達型載體

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