1樓：35豆豆
pcr產物酶切後不能判斷是否完全..
質粒如果切下來的片斷不是很小,可以取少量進行電泳檢視條帶..如果沒有完全酶切,大條帶會出現單酶切的產物條帶.
2樓：匿名使用者
你是不是要把雙酶切後的質粒與載體連線，而無論是pcr還是載體都無法通過電泳判斷是否酶切完全，所以不好進行連線呀？對於pcr產物一般會採取這樣的策略，將產物首先連線到t載體上，然後再用設計好的雙酶切，電泳**切下的條帶，這樣就能確保得到的是完全酶切的產物。載體判斷比較麻煩，要看載體本身、多大雙酶切為點之間的條帶有多大、雙切前後的大小是否能通過電泳區別出來，但是雙切位點一般都在標記基因裡面，所以插入片段的載體會在後期轉化可以後區分開，所以也沒有太大必要確定他是否完全，只要充分酶切就好了。
3樓：百浩生物
這個一般酶切一到兩個小時就結束。再去電泳分離，將你要的片段（根據理論大小）切膠**。
因而你不用去判斷是否酶切完成或者完全酶切開了（只要90%或者以上的都切開就行了）。如果你非要百分之百的切開，可能電泳也難以檢測。而且意義不大。
如果你想節省內切酶，也可以切過夜。不過如果你的質粒提的質量不高，可能讓質粒降解。一般兩個小時足夠了。
4樓：
1、你的實驗目的是什麼？
2、如果是克隆，連線t載體後不用酶切，直接轉化菌落pcr檢測有目的條帶的話送樣測序即可。
3、如果是做表達載體構建，pcr產物和質粒dna酶切後與沒有酶切的在同一塊膠上電泳，如果兩個酶切位點很近，幾乎看不到被切下來的小片段條帶（太小，早就跑出去了）。你要是怕酶切不完全就多稍微加點酶，切的時間長一點。
4、關於酶切產物有幾條帶視酶切效果而定，酶切完全則兩條，一大一小（小的可能看不到，原因見3、）酶切不完全則三條帶，一大一小及未切開的pcr產物；質粒的話可能還多一條環狀分子和線狀分子的區別。
extaq酶的pcr產物連線前應該雙酶切掉t嗎
5樓：雨季未聽過水瓶
你是不是要把雙抄酶切後的質粒與
襲載體連線，bai而無論是pcr還是載體都無du法通過電泳判斷是否酶切完zhi
全，所以不dao好進行連線呀？對於pcr產物一般會採取這樣的策略，將產物首先連線到t載體上，然後再用設計好的雙酶切，電泳**切下的條帶，這樣就能確保得到。
質粒酶切前後電泳結果有什麼不同，PCR產物和質粒雙酶切後電泳如何判斷酶切完成？
angela韓雪倩 如果是單酶切，超螺旋質粒會變成開鏈dna，開鏈的dna在凝膠中泳動速度慢於超螺旋質粒，因此條帶會偏大，這是酶切充分的情況。如果不充分，就會有大小有差距的幾條帶 如果是雙酶切，而且片段大小適中，可以看見酶切的片段和載體，還有未切開的質粒。能不能區分超螺旋質粒和開鏈質粒，和所用瓊脂糖...
轉化後菌液pcr有目的條帶，然後提質粒和雙酶切驗證。但是沒有
劉家小妮兒 1.用水不會有太大影響，只是質粒在水中儲存不如在elution中穩定，最好還是用試劑盒的elution 2.你提的質粒是連有目的基因的話，可以空載在前，中間是marker，後邊重組質粒，一般如果目的基因比較小的話，不會有太多區別，可以雙酶切後看條帶數 重組質粒酶切後有兩條帶。3.一般酶切...
20ul雙酶切體系和10ul雙酶切體系的區別
麼破1自我 20ul雙酶切體系和10ul雙酶切體系的區別 dna的量是3.5微升1 產物濃度不同 20ul雙酶切體系比10ul雙酶切體系產物的濃度高。2 dna反應量不同 20ul雙酶切體系所含dna要比10ul雙酶切體系含有的dna多，進行雙酶切時所要切的dna量也不同。研究中常用的雙酶切體系就是...