PCR為什么要測溫,PCR為什麼要測溫

時間 2022-09-23 07:55:06

1樓:內六角網路科技

1、良好的實驗室管理中包含了對儀器的定期質控。

2、定期對pcr儀進行溫度測定可以完善實驗室的質量管理體系。

3、pcr儀的溫度條件和狀態對於pcr試劑盒的研發和應用來說,是必不可少的條件之一。

4、根據測溫的結果可以避免某些試劑盒對某些特定品牌型號儀器的依賴,拓寬試劑盒的應用範圍。

5、在合格的儀器上做實驗可以極大的節約人力物力。

6、對於擁有老舊儀器和高強度使用的實驗室來說,節省效果尤為明顯。

北京內六角科技提供的pcr儀溫度檢測服務,採用國際主流的15通道實時動態溫度記錄的溫度檢測系統,結合自主研發的溫度分析軟體,創新的在傳統的分析溫度準確性、均勻性等基礎上,對溫度過沖的過程進行了詳細的分析,並嘗試推出了pcr儀溫控狀態的分類標準和對每臺檢測過的pcr儀進行溫度和時間值修正指導的服務。

pcr儀溫度主要檢測專案簡介:

●升降溫速率

●準確性

●當勻性

●過沖情況

●個性化檢測要求

2樓:跺多馭役佛

pcr三步驟:變性、退火、延伸,變性是高溫下dna雙鏈變成單鏈,退火是低溫下引物跟dna模板結合,引物不跟模板配對,是沒法擴增的

基因鑑定為什麼先要經過pcr技術?不可以直接進行鑑定嗎?

3樓:匿名使用者

基因鑑定時一定要先經過pcr技術,直接進行鑑定是不行的。

基因鑑定技術是一項生物學檢測技術,人體細胞有總數約為30億個鹼基對的dna,每個人的dna都不完全相同,人與人之間不同的鹼基對數目達幾百萬之多,因此通過分子生物學方法顯示的dna圖譜也因人而異,由此可以識別不同的人。所謂「dna指紋」,就是把dna作為像指紋那樣的獨特特徵來識別不同的人。由於dna是遺傳物質,因此通過對dna鑑定還可以判斷兩個人之間的親緣關係。

基因鑑定的原理其實是dna分子雜交,這種分子雜交是在緩衝液中進行的,由於dna分子雜交時,兩個分子相遇的機會不是很大,所以就需要眾多的帶有目的基因的dna與待測的dna分子,而pcr技術就是將目的基因進行擴增的一種技術手段,所以在進行基因鑑定時並不是直接進行鑑定的,而是先進行pcr技術將目的基因擴增再進行鑑定。

4樓:

首先基因是看不見的,所有關於基因的操作都是帶有盲目性的,或者說成功率都表示很高。

所以提取出來的基因只是個別的,需要進行復制讓數量變得多,才可以用來進行各種實驗。

而pcr就是對dna進行復制數量變多的最有效方法。

pcr實驗室對溫度的要求

5樓:匿名使用者

控溫25度,我覺得控溼也很關鍵,溼度太大的時候經常會汙染

6樓:

實驗室?那個是個儀器啊。全自動的,編個程式就自己執行了。 對外界溫度沒有什麼要求啊,只是操作在冰面上就好。

當然。理論上,實驗室溫度越低越好。

7樓:紫隕微藍

實驗操作過程中只是試劑需要儲存在冰盒或冰箱內,防止其變性,具體實驗對溫度沒什麼要求,室溫即可

8樓:答不對你抽我

室溫主要影響試劑和樣品的活性。都要儲存在冰裡用的時候再取出。

如果室溫過高,會引起保溫時間不足的問題,會出現假陰性或者產量低等。應該引起一些注意。

9樓:匿名使用者

實驗室控制在25左右進行

為什麼pcr儀蓋的溫度要高達105攝氏度?

10樓:匿名使用者

這是熱蓋技術,蓋的溫度在105攝氏度時就會防止pcr過程中水分在蓋上凝整合水滴。

11樓:

是為了防止微量的樣品揮發。

dna經過pcr後為什麼要電泳?它的目的是什麼?

12樓:匿名使用者

個人認為是為了提純,清理掉不需要的雜質和其他片斷。

13樓:朱嘉辰

鑑別區分不同dna,看看pcr擴增是否成功

pcr為什麼要在冰上操作?

14樓:浙大阿米巴

這些個材料都容易變質,taq要失活,引物會降解,模板會斷裂……所以要保持低溫,而且用完要馬上放回-20℃冰箱儲存。

15樓:匿名使用者

因為這些都很容易失活的,還有要注意引物和dntp不要反覆凍融,也容易失活的

16樓:

以上說的不夠全面。

這個叫冷啟動,第一怕taq酶降低活性,第二為更好的首輪解鏈,提高最終的特異性。

17樓:貓紫_璨

taq酶是耐高溫的dna聚合酶~

酶活在低溫時幾乎不顯現但不至失活~放到pcr儀裡時又能繼續表現高活力在冰盒上操作是防止反應底物提前在室溫下發生反應~操作時還有注意,儘量不用手去接觸小管底部,而是輕拿靠近管口處,因為手上的溫度可是夠高的喲~

18樓:匿名使用者

在冰上可以保持各種酶及底物不失活,同時也使得酶的活性很低

對於pcr的taq酶以及分子生物學中很多酶而言,在室溫下是有活性的,若在室溫下操作,你在東西未加好之前就已經有副反應進行了,這不利於實驗

實際上,很多時候也沒這麼嚴格,pcr如果樣品不多,完全可以在室溫下操作

19樓:匿名使用者

tritton的穿透力太強,溫度底的時候可以防止質粒汙染過度。

tap酶在低溫時降低反應和代謝,延長時間。促使反應穩步不燥的進行。

20樓:匿名使用者

保證酶活,核酸物質穩定.

什麼是pcr檢測?他的原理是什麼?需要什麼材料?

21樓:中國風習

pcr(聚合酶鏈反應):類似於dna的天然複製過程,其特異性依賴於與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。

基本原理:pcr技術的基本原理類似於dna的天然複製過程,其特異性主要依賴於和靶序列兩端互補的寡核苷酸引物,它由變性——復性——延伸三個基本反應步驟構成。

所需材料:

模板dna

正二價鎂離子

引物反應緩衝液

taqdna聚合酶

拓展回答:

反應特點

特異性強。

pcr反應的特異性決定因素為:

①引物與模板dna特異正確的結合。

②鹼基配對原則。

③taq dna聚合酶合成反應的忠實性。

④靶基因的特異性與保守性。

靈敏度高。

pcr產物的生成量是以指數方式增加的,能將皮克(pg=10-12)量級的起始待測模板擴增到微克(μg=-6)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,pcr的靈敏度可達3個rfu(空斑形成單位);在細菌學中最小檢出率為3個細菌。

簡便、快速。

pcr反應用耐高溫的taq dna聚合酶,一次性地將反應液加好後,即在dna擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性汙染、易推廣。

純度要求低。

不需要分離病毒或細菌及培養細胞,dna 粗製品及rna均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛髮、細胞、活組織等dna擴增檢測。

定量pcr為什麼要用兩步法而不是普通的三步法

22樓:南京金益柏生物科技****

你這個結論並不對。兩步法,三步法並沒有本質區別,訊號的讀取都是在每一個延長結束後讀取。定量pcr一開始的時候也是三步法的。

兩步法,是因為設計引物的時候把退火溫度設為酶的工作溫度,而且定量pcr的產物都很短,需要的時候都短,所以兩步法更方便。三步法的話,花的時間長,不利於快速實驗。

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