生物中滅菌方法有哪些,生物學中的滅菌方法有哪些

時間 2021-06-04 05:51:30

1樓:中國農業出版社

(1)加熱滅菌法

利用高溫來殺死微生物(超過最高生長溫度)的方法。加熱滅菌的原理:當高溫作用於微生物時,首先引起細胞內生理生化反應速率加快,機體內對溫度敏感的物質如蛋白質、核酸等,隨著溫度的增高而遭受不可逆的破壞,盡而導致細胞內原生質體的變化、酶結構的破壞,從而使細胞失去了生活機能上的協調,停止了生長髮育。

隨著高溫的繼續作用,細胞內原生質便發生凝固,酶結構完全破壞,活動消失,生化反應停止,滲透交換等新陳代謝活動消失,細胞死亡。加熱滅菌可分乾熱滅菌和溼熱滅菌兩大類。

1)乾熱滅菌 利用灼燒或乾熱空氣滅菌而沒有飽和水蒸氣參加的滅菌法稱為乾熱滅菌法。由於乾熱滅菌使用方便,方法簡單,故在生產上廣泛應用。如火焰滅菌法:

直接利用火焰把微生物燒死,故又稱焚燒滅菌法。採用此法滅菌既徹底又迅速,但只適用於金屬製的接種工具、試管口及汙染物品等的處理。熱空氣滅菌法:

即在電熱恆溫乾燥箱中利用乾熱空氣來滅菌。

2)溼熱滅菌 即利用蒸汽進行滅菌的方法。溼熱滅菌又分為高壓、常壓、間歇滅菌和巴氏滅菌4種。

①高壓蒸汽滅菌 由於高壓蒸汽具有較強的穿透力和較常壓高的溫度,能大大縮短滅菌時間,提高工作效率,加之蛋白質在溼熱條件下容易變性,在熱蒸汽條件下,細菌的芽孢在120℃,經20~30分鐘可全部被殺死。如滅菌材料體積較大,不易被穿透時,可將壓力增加到0.152兆帕,延長至1~2小時。

在高壓蒸汽滅菌中,滅菌溫度隨蒸汽壓力的增加而升高(圖2-6)。

圖2-6 高壓蒸汽滅菌鍋

在使用高壓滅菌鍋時,要完全排出鍋內的空氣而以飽和蒸汽代之。如果空氣不排除乾淨,則鍋內溫度將低於同樣壓力下由純飽和蒸汽產生的溫度,影響滅菌效果。

此法適用於各種耐熱物品的滅菌,如一般培養基、生理鹽水等各種溶液、玻璃器皿、工作服等。所採用的蒸汽壓力與時間,應根據待滅菌物品的性質、體積與容器型別等決定。

②常壓蒸汽滅菌 這是採用自然壓力、100℃蒸汽進行滅菌的方法。它裝置簡單、成本低,當前使用最廣泛。只要砌一個爐灶,買1~2只大鍋,上面用磚和水泥砌成,也可用大鐵桶、木桶等,體積大小可自行決定,但不宜過大,以裝800~1500瓶為好。

設計常壓灶時應注意的問題:大小根據生產規模來定,灶頂部最好製成拱圓形,這樣冷凝水可沿灶的內壁下流而不會打溼棉塞;灶倉內要有層架結構,以便分層裝入滅菌物;灶上應安裝溫度計,可隨時觀察灶內溫度的變化;因滅菌時間長,鍋內水不夠蒸發,故容量大的灶要安裝加水裝置;灶倉的密閉程度要儘可能高,這樣既提高滅菌效果,又節省燃料。菇農在生產中還常用一種小型蒸汽發生裝置,引出蒸汽後直接通到下邊用木條塹起、四周用多層塑料布密封的菌袋堆中進行常壓滅菌。

這種方法不用建灶,簡便省工(圖2-7)。常壓滅菌一般水燒開後保持8~10小時,悶一夜即可。

圖2-7 簡易常壓滅菌法

③常壓間歇蒸汽滅菌法 這是利用常壓蒸汽反覆幾次滅菌的方法。具體做法是將待滅菌物品放在鍋內,100℃處理1小時左右,殺死微生物的營養細胞,讓其冷卻至30℃左右,此時芽胞會萌發,再以同樣方法加熱處理,反覆3次,可達到滅菌目的。該方法可用於不耐高溫的藥品、營養物、特殊培養基的滅菌。

④低溫巴氏滅菌法 即在60~70℃下,經一定時間,殺死有害微生物的方法。適應於不耐高溫的物品消毒。有些培養基,在高溫下遭到破壞,用此法既可殺死致病微生物的營養體,又能使培養基的成分不致受到嚴重破壞。

食用菌生產中培養料堆積發酵工藝,就是利用這個原理殺死其中的病蟲、雜菌。

(2)過濾除菌法

又分液體過濾和空氣過濾兩種,就是採用機械的方法,設計一種濾孔比細菌還小的篩子,做成各種過濾器,通過機械過濾,只讓液體培養基或空氣從篩孔流出,各種微生物菌體則留在篩子上,從而達到除菌的目的。這種方法適用於對熱不穩定的體積小的液體培養基(如動物血清、蛋白質、酶、維生素等)及氣體的滅菌。超淨工作臺的工作原理就是將帶菌空氣通過過濾滅菌形成無菌空氣,從風洞中吹出,來造成工作臺範圍的無菌狀態。

過濾滅菌的最大優點是不破壞培養基中各種物質的化學成分。常用的過濾器有用矽藻土製的、石棉製的、陶瓷土製的,也有用火棉膠、硝化纖維素濾膜製成的。

(3)輻射滅菌法

利用輻射產生的能量進行殺菌的方法稱輻射滅菌。輻射可分電離輻射和非電離輻射兩種,α-射線、β-射線、γ-射線、x-射線、中子和質子、微波等屬電離輻射,紫外線、臭氧、日光為非電離輻射。

1)紫外線滅菌 紫外線殺菌的原理是利用紫外線的輻射作用。用燈管直接照射細菌使其發生光化學反應,將細菌細胞質誘導形成胸腺嘧啶雙聚體,從而抑制dna的複製而發生變性、致死。另一方面,空氣在紫外線照射下產生的臭氧(o3),也具有一定的殺菌作用。

紫外線的有效作用距離為1.2~2.0米。

紫外燈一般懸吊在接種室或培養室的上方,個數依房間大小而定,容1~2個人操作的接種室,安裝一個30瓦的紫外燈就可以了。在每次接種前,應將所需的器具一起放入接種室(箱)內,然後開啟紫外燈照射。如果接種室體積較大,開燈照射2小時才能達到滅菌效果;如果較小,只需開燈半小時左右既可達到滅菌效果。

由於紫外線穿透力弱,即使是普通玻璃也不能濾過,因此,只適於空氣或物體表面的滅菌。紫外線對人體**,尤其是眼睛有殺傷作用,應避免直視,工作時應將紫外燈關閉。紫外線消毒時工作場所如果處在稍暗無光的情況下,能提高殺菌效果。

細菌接受致死量紫外線照射後,隨即給予可見光照射,部分細菌有復活的可能。幹細胞比溼細胞對紫外線的抗性強,孢子比其營養細胞對紫外線更具抗性。

2)微波滅菌 由於微生物的細胞中都含有70%~90%的水分,水分子在微波電場中被極化,並隨著電場方向的改變而轉動,在轉動過程中分子之間高速度摩擦產生熱能,這種熱能不同於外部加熱,可在短時間裡使細胞爆破而物體本身的溫度卻只有極微增加,從而達到滅菌效果。用ym7601型微波爐只需60秒鐘就能殺死食品中192萬個大腸桿菌。

3)臭氧發生器消毒 臭氧(o3)具有強烈的氧化作用,能破壞微生物的細胞膜與核酸。o3也是一種暫態物質,常溫下能自然分解,還原成氧。其滅菌原理實際上和紫外線消毒極相似。

2樓:廣西師範大學出版社

在瞬息萬變的生活環境裡,我們無時無刻不受到數以億計的病菌的侵襲。人類為了保衛自身的健康,在體內和體外一直與病菌進行著無聲激戰。在保衛人體的外圍戰中,人們根據不同需要採用了不同的方法來擊退病菌的侵犯,滅菌、消毒和防腐,就是三種常用而程度不同的鬥爭方法。

滅菌,是在一定範圍內消滅物體上所有微生物的方法。醫院裡對手術器械通常採用間歇滅菌法,即把器械煮沸30分鐘,在20—37℃的恆溫環境中放置一天,這樣,某些沒有殺死的微生物芽孢會誤以為危險期已過,「放心大膽」地進行繁殖,這時再蒸煮殺菌,連續反覆幾次,手術器械便可以達到完全沒有微生物的要求。高壓蒸汽和乾熱空氣兩種方法都可以用於滅菌,不過由於多數微生物的耐乾熱性較強,所以高壓蒸汽滅菌一般僅需在121℃溫度、30分鐘的條件下即可達目的,而乾熱空氣滅菌的條件則為140℃、4小時。

除此之外,太陽光中的紅外線可以使微生物細胞中的水分大量蒸發,紫外線又能使微生物細胞中的核酸分子發生變化,所以常晒衣服和被褥是一種廉價的滅菌方法。

消毒,是不徹底的滅菌方法。因為在許多場合下不需要把微生物全部殺死,只要消毒就可以了。例如手上碰破了一塊皮,可以擦些紫藥水或紅藥水;打針的時候,大夫先用碘酒、後用酒精給**消毒,這些都是為了達到區域性滅菌的目的。

在使用消毒藥水時,千萬不要把紅藥水和碘酒同時擦到**上,以免引起中毒。巴斯德經過多次實驗確認:把鮮牛奶加熱到71℃,持續15分鐘,即可以消滅其中的結核桿菌和傷寒桿菌,又不致於損壞牛奶的營養價值和風味。

在這之後,人們普遍地使用這種方法儲存牛奶。這就是有名的巴氏消毒法。

依靠各種手段抑制某些微生物生長繁殖的過程,叫做防腐。人們經常把多餘的魚肉、蔬菜和水果或晒乾,或鹽醃,或製成蜜餞,這是因為微生物的繁殖需要一定的水分,而經過處理的食物不含或只含極少量的水分,從而剷除了滋生微生物的「溫床」,起到了儲存食物的作用。微生物的生長還受溫度的影響,一般細菌在30—37℃、黴菌在25—28℃生長最旺盛,如果降低溫度便可以減弱微生物的生命活動,或者使它們處於休眠狀態,因此人們利用冰箱、冰庫來貯藏肉、蛋。

但是冷藏僅僅是為了防腐,達不到滅菌和消毒的作用,所以冷藏食物需要有時間限制,一旦超過了冷藏期,微生物適應了低溫環境,會從休眠中「醒來」,導致食物變質。肉類一般在低溫下可以儲存一年左右,蛋類的儲存期更長一些。

時至今日,人們找到了並且還在繼續尋找戰勝有害微生物的有利**。

3樓:聽風

滅菌是指使用強烈的理化因素殺死物體內外所有微生物,包括芽孢和孢子.

實驗室裡常用的滅菌方法有:灼燒滅菌、乾熱滅菌、高壓蒸氣滅菌.

(滅菌與消毒是不同的,用紫外線處理屬於消毒.)

4樓:地久天長有沒有

高溫加熱或者使用化學制劑

生物學中的滅菌方法有哪些

5樓:匿名使用者

在生物學上,滅菌方法主要包括以下三類:

第一、灼燒滅菌;

第二、乾熱滅菌;

第三、高壓蒸汽滅菌。

微生物學實驗常用的滅菌方法有哪些

6樓:匿名使用者

一般分為溼熱滅菌法和乾熱滅菌法兩種。

一、溼熱滅菌法是指用飽和水蒸氣、沸水或流通蒸汽進行滅菌的方法,由於蒸汽潛熱大,穿透力強,容易使蛋白質變性或凝固,所以該法的滅菌效率比干熱滅菌法高,是最常用的滅菌方法。溼熱滅菌法可分為:煮沸滅菌法、巴氏消毒法、高壓蒸汽滅菌法、流通蒸汽滅菌法、和間歇蒸汽滅菌法。

(1)煮沸滅菌法:將水煮沸至100攝氏度,保持5-10分鐘可殺死細菌繁殖體,保持1-3小時可殺死芽胞。在水中加入百分之一至百分之二的碳酸氫鈉時沸點可達105攝氏度,能增強殺菌作用,還可去汙防鏽。

此法適用於食具、刀箭、載玻片及注射器等。

(2)巴氏消毒法:一種低溫消毒法,因巴斯德首創而得名。有兩種具體方法,一是低溫維持法:

62攝氏度維持30分鐘;二是高溫瞬時法:75攝氏度作用15-30秒。該法適用於食品的消毒。

(3)流通蒸氣滅菌法:利用常壓下的流通蒸汽進行滅菌。

(4)間歇蒸汽滅菌法

(5)高壓蒸汽滅菌法:103.4千帕蒸汽壓溫度達121.3攝氏度,維持15-20分鐘。

二、乾熱滅菌法是指在乾燥環境(如火焰或乾熱空氣)進行滅菌的技術。一般有火焰滅菌法和乾熱空氣滅菌法。

(1)火焰滅菌法:是指用火焰直接燒灼的滅菌方法。該方法滅菌迅速、可靠、簡便,適合於耐火焰材料(如金屬、玻璃及瓷器等)物品與用具的滅菌,不適合藥品的滅菌。

(2)乾熱空氣滅菌法:是指用高溫乾熱空氣滅菌的方法。該法適用於耐高溫的玻璃和金屬製品以及不允許溼熱氣體穿透的油脂(如油性軟膏機制、注射用油等)和耐高溫的粉末化學藥品的滅菌,不適合橡膠、塑料及大部分藥品的滅菌。

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