1樓：仇淑珍展月
實時熒光定量pcr技術，是指在pcr反應體系中加入熒光基團，利用熒光訊號積累實時監測整個pcr程序，最後通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。
pcr(聚合酶鏈式反應）是利用dna在體外攝氏95°高溫時變性會變成單鏈，低溫（經常是60°c左右）時引物與單鏈按鹼基互補配對的原則結合，再調溫度至dna聚合酶最適反應溫度（72°c左右），dna聚合酶沿著磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互補鏈。
恆溫pcr和實時熒光定量pcr的不同，是不同在實時熒光定量pcr的系統中加入了熒光染料（sybr
green
或taqman
探針等等）。以sybr
green為例，這種染料可以結合在雙鏈的dna上，當pcr不斷進行時，每一次退火生成的雙鏈dna也在增加，熒光染料結合也越多，熒光也越強。在機器中有一個探測熒光的探頭，可以定量檢測熒光的強度，轉換成數值。這樣就可以實時記錄反映體系中dna的反應情況。
熒光pcr更有優勢，因為熒光pcr靈敏度高於恆溫pcr，同樣**也高一些。
2樓：匿名使用者
區別不大，這兩款儀器的功能與風途的ft-pcr熒光定量pcr儀相同，不錯哦
實時熒光定量pcr與普通pcr的區別是什麼？結果有何異同？能說明的問題是什麼？
3樓：麼破1自我
二者結果相同。都能說明生物體外的特殊dna複製的整個過程的擴增效率和溶解溫度情況。
區別：1、二者系統組成不同
熒光定量pcr儀比普通的pcr儀多了熒光訊號採集系統和計算機分析處理系統。
2、二者原理不同
熒光定量pcr實時監測與dna結合的熒光染料激發的熒光，普通ocr通過檢測插入dna中核算染料的量來測定pcr最終產物量。
3、二者反應要求不同
熒光定量pcr對擴增片段有較高的要求，一般為100-300bp，普通pcr可以擴增長點的片段。
4、二者應用不同
熒光定量pcr主要是用來定量分析和確定基因轉錄水平的，普通的pcr儀是做定性分析和擴增基因片段，定量pcr儀可以做普通pcr儀的工作，反之不行。
5、二者測量成本不同
定量pcr儀**較為昂貴，普通的基因擴增儀(pcr儀)只能夠定性地分析是否存在目標片段。但是**要低很多，而且執行成本也要低很多。
實時熒光定量pcr技術有效地解決了傳統定量只能終點檢測的侷限，實現了每一輪迴圈均檢測一次熒光訊號的強度，並記錄在電腦軟體之中，通過對每個樣品ct值的計算，根據標準曲線獲得定量結果。
4樓：匿名使用者
原理不同：熒光定量pcr實時監
測與dna結合的熒光染料激發的熒光；普通pcr通過檢測插入dna中核算染料的量來測定pcr最終產物量，一般是紫外光。
反應要求：熒光定量對擴增片段有較高的要求，一般為100-300bp；普通定量可以擴增長點的片段。如果不需要檢測產物分子量大小，熒光定量可以不進行電泳就對產物進行定量分析，普通pcr必須電泳。
結果：熒光定量可以實現精確定量，普通pcr則不行。熒光定量體現可以看到整個擴增過程，可以看到擴增效率，溶解溫度，直接得到的標準曲線等，這些是普通pcr無法實現的。
如果還不清楚建議去丁香園等**逛逛，希望可以幫到你
5樓：匿名使用者
所謂實時熒光定量pcr技術，是指在pcr反應體系中加入熒光基團，利用熒光訊號積累實時監測整個pcr程序，最後通過標準曲線對未知模板進行「定量分析」的方法。
記住，實時熒光定量是定量分析
6樓：匿名使用者
熒光pcr是為了測量mrna表達量的 普通pcr是為了擴增目的片段的
7樓：匿名使用者
熒光定量是定量的，普通pcr是定性的，結果一個是說明含有多少，另一個說明有還是沒有，前者更精確一點
恆溫pcr和實時熒光定量pcr這兩種有什麼區別？哪個更有優勢？
8樓：最純粹的自由
實時熒光定量pcr技術，是指在pcr反應體系中加入熒光基團，利用熒光訊號積累實時監測整個pcr程序，最後通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。
pcr(聚合酶鏈式反應）是利用dna在體外攝氏95°高溫時變性會變成單鏈，低溫（經常是60°c左右）時引物與單鏈按鹼基互補配對的原則結合，再調溫度至dna聚合酶最適反應溫度（72°c左右），dna聚合酶沿著磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互補鏈。
恆溫pcr和實時熒光定量pcr的不同，是不同在實時熒光定量pcr的系統中加入了熒光染料（sybr green 或taqman 探針等等）。以sybr green為例，這種染料可以結合在雙鏈的dna上，當pcr不斷進行時，每一次退火生成的雙鏈dna也在增加，熒光染料結合也越多，熒光也越強。在機器中有一個探測熒光的探頭，可以定量檢測熒光的強度，轉換成數值。
這樣就可以實時記錄反映體系中dna的反應情況。
熒光pcr更有優勢，因為熒光pcr靈敏度高於恆溫pcr，同樣**也高一些。
9樓：傅浩川
恆溫pcr主要是，確定是否存在一段特異的dna序列。
但是熒光定量pcr是看溶液中特異的pcr序列的濃度。
兩者沒有什麼優勢。一般的可能就是功能簡單但是便宜。主要是便宜熒光的很貴 很貴 不是一般的貴！！
實時熒光pcr方法靈敏度略高於恆溫pcr，但儀器昂貴，試劑消耗也相對更貴，適合向高階客戶推廣；恆溫pcr大部分效能與實時熒光pcr相對，靈敏度稍低於實時熒光pcr，但儀器價效比高，更利於推廣。實際推廣中對高階客戶可以採取用恆溫pcr作為契機，在交流中如客戶對靈敏度有高要求而又有一定實力的可推薦使用實時熒光pcr產品。
10樓：匿名使用者
實時熒光pcr方法靈敏度略高於恆溫pcr，但儀器昂貴，試劑消耗也相對更貴，適合向高階客戶推廣；恆溫pcr大部分效能與實時熒光pcr相對，靈敏度稍低於實時熒光pcr，但儀器價效比高，更利於推廣。實際推廣中對高階客戶可以採取用恆溫pcr作為契機，在交流中如客戶對靈敏度有高要求而又有一定實力的可推薦使用實時熒光pcr產品。
實時熒光定量pcr和定量pcr有什麼區別
11樓：殷秀梅森煙
完全兩個不同的概念，梯度pcr是指你的pcr儀在設定的時候可以同一時間不同位置設定一個從高到低的溫度梯度，以便在不知道退火溫度的情況下選擇一個最適宜的退火溫度。二實時熒光定量pcr是通過再pcr過程中摻入熒光染料或釋放熒光基團，從而對模板進行相對定量或絕對定量的實驗，在實時熒光定量pcr時也可以設定梯度，總的來說實時熒光定量pcr是一種實驗方法，而梯度pcr是一種實驗手段
12樓：令狐連枝傅嬋
實時熒光是反應熒光數值定量，普通那種是通過條帶半定量，現在做半定量的已經很少了，除非是一些驗證試驗必須要圖的
pcr,rt-pcr,實時熒光定量pcr的區別與聯絡
13樓：永恆的瞬間綻放
1、所說的pcr應該就是最常規的pcr，以dna為模板，通過上下游引物，實現dna的擴增。
2、rt-pcr一般情況下是指反轉錄pcr（reverse transcription），儘管有些資料上說實時熒光定量pcr也（realtime fluores-cence quantitative pcr）也簡稱rt-pcr，但是這是不對的，不推薦。
基本操作過程是將所提取的rna進行反轉錄，然後將所獲得的cdna作為模板，設計引物進行擴增，是一種檢測基因表達的常用方法。
3、實時熒光定量pcr也就是real-time pcr，其最大的作用是檢測樣品中的初始dna濃度。
至於三者的關係，rt-pcr和實時定量pcr應該都屬於pcr，在rna實驗中，這二者都會應用到。
例如你要比較2個組織中的某基因的表達差異，首先你要提取2個組織的總rna，然後通過rt-pcr檢測該基因是否在2個組織中有表達，然後通過實時定量pcr測定該基因在2個組織中的表達量是否具有顯著性差異。
擴充套件資料：
pcr原理
dna的半保留複製是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈dna在多種酶的作用下可以變性解旋成單鏈，在dna聚合酶的參與下，根據鹼基互補配對原則複製成同樣的兩分子拷貝。
在實驗中發現，dna在高溫時也可以發生變性解鏈，當溫度降低後又可以復性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制dna的變性和復性，加入設計引物，dna聚合酶、dntp就可以完成特定基因的體外複製。
但是，dna聚合酶在高溫時會失活，因此，每次迴圈都得加入新的dna聚合酶，不僅操作煩瑣，而且**昂貴，制約了pcr技術的應用和發展。
耐熱dna聚合酶-taq酶的發現對於pcr的應用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個迴圈加酶，使pcr技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本，pcr技術得以大量應用，並逐步應用於臨床。
pcr技術的基本原理類似於dna的天然複製過程，其特異性依賴於與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。pcr由變性-退火-延伸三個基本反應步驟構成：
①模板dna的變性：模板dna經加熱至93℃左右一定時間後，使模板dna雙鏈或經pcr擴增形成的雙鏈dna解離，使之成為單鏈，以便它與引物結合，為下輪反應作準備；
②模板dna與引物的退火（復性）：模板dna經加熱變性成單鏈後，溫度降至55℃左右，引物與模板dna單鏈的互補序列配對結合；
③引物的延伸：dna模板-引物結合物在72℃、dna聚合酶（如taqdna聚合酶）的作用下，以dntp為反應原料，靶序列為模板，按鹼基互補配對與半保留複製原理，合成一條新的與模板dna鏈互補的半保留複製鏈，重複迴圈變性-退火-延伸三過程就可獲得更多的「半保留複製鏈」，
而且這種新鏈又可成為下次迴圈的模板。每完成一個迴圈需2～4分鐘，2～3小時就能將待擴目的基因擴增放大幾百萬倍。
熒光定量pcr和實時熒光定量pcr還有反轉錄pcr都是什麼呀？有什麼區別，分別是什麼作用啊？謝謝啊
14樓：匿名使用者
實時就是指每個階段的熒光都有收集，其實現在所有的熒光定量pcr儀器都是實時的。熒光定量pcr的英文簡寫是：fq-pcr，f是熒光的縮寫，q是定量的縮寫。
（或者寫成是rt-pcr。rt就是realtime的縮寫）。
做定量pcr的目的是為了瞭解起始模板數的量，這個一下寫不清楚，你看一個說明書絕對看得懂。
而反轉錄pcr就是把mrna反轉錄成cdna，簡寫也是rt-pcr。不過和上面的不同！這個rt是reverse transcript的縮寫！
其實啊，對於做表達量的實驗而言，反轉錄pcr是熒光定量pcr的第一步，很多人是這麼來描述的：rt-qpcr。這個rt就是反轉錄，這個q是指定量。
總之，自己好好看說明書！
恆溫PCR和實時熒光定量PCR這兩種有什麼區別？哪個更有優勢
魯賢洪子 實時熒光定量pcr技術，是指在pcr反應體系中加入熒光基團，利用熒光訊號積累實時監測整個pcr程序，最後通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。pcr 聚合酶鏈式反應 是利用dna在體外攝氏95 高溫時變性會變成單鏈，低溫 經常是60 c左右 時引物與單鏈按鹼基互補配對的原則結合，再調溫...
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