為什麼真核DNA無法用鹼裂解法提取

時間 2021-09-02 20:47:42

1樓:祝略光孤晴

dna在鹼性條件下氫鍵會斷裂,提取質粒的ph值大約是12吧,我也記不清了。在這種情況下氫鍵理所當然的會斷裂,當然磷酸與核糖間的化學鍵也會斷一些。

提取質粒一般用的是大腸肝菌。

大腸肝菌的質粒dna和染色dna都會發生上述情況,但由於質粒是環狀結構,雖然dna也會變性斷裂氫鍵,但螺旋結構卻基本不會被破壞,也就是兩條單鏈環還是絞在一起。而染色dna的兩條鏈卻分開了。然後降低ph,應該是降到5左右,我記不清楚了。

質粒的兩條鏈之間的氫鍵又會複合,而染色dna的兩條鏈卻不像質粒那般複合,眾多的染色dna會形成網狀結構,沉澱下來。從而得到質粒dna。

真核生物的dna為線狀的,也會象上面的那樣不能得到完整的dna。

2樓:伊玉花以念

鹼裂解法只能提取質粒,因為質粒是環形雙鏈比較好恢復,而基因組就無法復性了。

基因組dna只能用表面活性劑法。

3樓:修秋英希詩

因為真核細胞dna上有蛋白質結合,如果用鹼裂解法就會把dna與蛋白質一起沉澱下去,無法分離出細胞核dna!

鹼裂解法提取質粒dna,原理是細胞內蛋白質在沉澱的過程中會把大的dna分子一起沉澱下去,質粒dna由於較小,不會被沉澱而進入上清液,因而可以通過離心將其分離出來!

然而真核dna與組蛋白緊密結合,無法用鹼裂解法提取出來!

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