為什麼提取rna時出現一坨白色沉澱

時間 2021-09-02 20:46:41

1樓:

異丙醇與蛋白質反應,使其沉澱。分析如下。採用強鹼液、加熱或溶菌酶(主要針對革蘭氏陽性細菌)可以破壞菌體細胞壁,十二烷基磺酸鈉(sds)和tritonx-100(一般很少使用)可使細胞膜裂解。

經溶菌酶和sds或tritonx-100處理後,細菌染色體dna會纏繞附著在細胞碎片上,同時由於細菌染色體dna比質粒大得多,易受機械力和核酸酶等的作用而被切斷成不同大小的線性片段。當用強熱或酸、鹼處理時,細菌的線性染色體dna變性,而共價閉合環狀dna(covalentlyclosedcirculardna,簡稱cccdna)的兩條鏈不會相互分開,當外界條件恢復正常時,線狀染色體dn**段難以復性,而是與變性的蛋白質和細胞碎片纏繞在一起,而質粒dna雙鏈又恢復原狀,重新形成天然的超螺旋分子,並以溶解狀態存在於液相中。在細菌細胞內,共價閉環質粒以超螺旋形式存在。

trnzol 法提取rna得白色沉澱,怎麼辦

2樓:匡雅霜

你這個得白色沉澱是什麼意思?

哪個步驟得到白色沉澱了?

加入異丙醇後,rna本來就會以白色沉澱的形式析出。

提取rna過程中加入異丙醇後沒有白色沉澱的原因是什麼

3樓:匿名使用者

這時的沉澱就是rna了。。可能的原因如下。

1.作為原料的細胞數量太少。

2.細胞裂解的時候不充分,嚴重影響產量

3.離心出來的沉澱很少很少,肉眼不容易分辨。

你可以從這幾個角度去找找原因。

有需要的話歡迎追問~

4樓:

量太少了 不一定看的出來 你還是提完溶一下測個濃度看看吧 經常是看不出來濃度都還不低

5樓:匿名使用者

主要是量少,肉眼不容易看到。但是離心後,在管壁上應該能看到沉澱。

為什麼提取質粒時加入異丙醇出現了白色絮狀沉澱? 5

6樓:傾城妃子活寶

異丙醇與蛋白質反應,使其沉澱。

1、採用強鹼液、加熱或溶菌酶(主要針對革蘭氏陽性細菌)可以破壞菌體細胞壁,十二烷基磺酸鈉(sds)和tritonx-100(一般很少使用)可使細胞膜裂解。經溶菌酶和sds或triton x-100處理後,細菌染色體dna會纏繞附著在細胞碎片上,同時由於細菌染色體dna比質粒大得多,易受機械力和核酸酶等的作用而被切斷成不同大小的線性片段。

2、當用強熱或酸、鹼處理時,細菌的線性染色體dna變性,而共價閉合環狀dna的兩條鏈不會相互分開,當外界條件恢復正常時,線狀染色體dn**段難以復性,而是與變性的蛋白質和細胞碎片纏繞在一起,而質粒dna雙鏈又恢復原狀,重新形成天然的超螺旋分子,並以溶解狀態存在於液相中。在細菌細胞內,共價閉環質粒以超螺旋形式存在。

3、異丙醇為無色透明液體,有似乙醇和丙酮混合物的氣味,能與醇、醚、氯仿和水混溶,能溶解生物鹼、橡膠、蟲膠、松香、合成樹脂等多種有機物和某些無機物,與水形成共沸物,不溶於鹽溶液。常溫下可引火燃燒,其蒸汽與空氣混合易形成**混合物。

7樓:成都癲癇匯康

異丙醇與蛋白質反應,使其沉澱。分析如下。

採用強鹼液、加熱或溶菌酶(主要針對革蘭氏陽性細菌)可以破壞菌體細胞壁,十二烷基磺酸鈉(sds)和tritonx-100(一般很少使用)可使細胞膜裂解。經溶菌酶和sds或triton x-100處理後,細菌染色體dna會纏繞附著在細胞碎片上,同時由於細菌染色體dna比質粒大得多,易受機械力和核酸酶等的作用而被切斷成不同大小的線性片段。當用強熱或酸、鹼處理時,細菌的線性染色體dna變性,而共價閉合環狀dna(covalently closed circulardna,簡稱cccdna)的兩條鏈不會相互分開,當外界條件恢復正常時,線狀染色體dn**段難以復性,而是與變性的蛋白質和細胞碎片纏繞在一起,而質粒dna雙鏈又恢復原狀,重新形成天然的超螺旋分子,並以溶解狀態存在於液相中。

在細菌細胞內,共價閉環質粒以超螺旋形式存在。

8樓:匿名使用者

首先要知道,質粒是 共價,閉合,環狀的dna(cccdna)。以常用的鹼裂解法為例:當菌體在naoh和sds溶液中裂解時,蛋白質與dna發生變性,當加入中和液後,

9樓:匿名使用者

異丙醇能使蛋白質變性,出現的絮狀沉澱應為蛋白質

10樓:一縷清風

首先:你要知道是從什麼菌種裡面提取質粒包括菌種一般常識,其次:是用什麼方法提取質粒包括原理,

再次:知道為什麼要加入異丙醇,起的作用是什麼?

最後:才可能知道白色絮狀沉澱是什麼。

加異丙醇是用來沉澱質粒的,出現白色絮狀沉澱,說明質粒提取純度不夠,也就是有蛋白質等汙染,蛋白質等雜質和質粒一起沉澱了,能看到,說明汙染已經特別嚴重了,

呵呵 ,可以用酚氯仿或者酒精沉澱再除雜一次,也可能是你得方法不好,

或者換個方法試試,

也可能是你操作的問題 比如 樣品用量大 超過了該方法的提取極限 等

分析清楚後 再做 祝你好運

為什麼我提取rna,用異丙醇後沒有沉澱出現

11樓:匿名使用者

前面提取的rna經異丙醇沉澱後,總會含有一些未除去的蛋白和其它雜質分子,這些蛋白和雜質分子如果不除盡的話,就會直接影響所提取的rna的純度和穩定性。為此,就需要用70%乙醇洗滌沉澱(因為在70%乙醇裡rna是不溶的,而一些蛋白和其它雜質分子卻可溶),並且最好是洗滌2次,然後高速離心後,倒去上清,即可得到較純的rna沉澱。用無水乙醇則達不到這個目的

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