酒精為什麼能沉澱DNA

時間 2021-09-13 15:40:42

1樓:瀟逍霄

此次試驗一般會有兩個疑問:

1.為什麼用無水乙醇沉澱dna?

用無水乙醇沉澱dna,這是實驗中最常用的沉澱dna的方法。乙醇的優點是可以任意比和水相混溶,乙醇與核酸不會起任何化學反應,對dna很安全,因此是理想的沉澱劑。

dna溶液是dna以水合狀態穩定存在,當加入乙醇時,乙醇會奪去dna周圍的水分子,使dna失水而易於聚合。一般實驗中,是加2倍體積的無水乙醇與dna相混合,其乙醇的最終含量佔67%左右。因而也可改用95%乙醇來替代無水乙醇(因為無水乙醇的**遠遠比95%乙醇昂貴)。

但是加95%的乙醇使總體積增大,而dna在溶液中有一定程度的溶解,因而dna損失也增大,尤其用多次乙醇沉澱時,就會影響收得率。折中的做法是初次沉澱dna時可用95%乙醇代替無水乙酵,最後的沉澱步驟要使用無水乙醇。也可以用0.

6倍體積的異丙醇選擇性沉澱dna。一般在室溫下放置15-30分鐘即可。

2.在用乙醇沉澱dna時,為什麼一定要加naac或nacl至最終濃度達0.1~0.25mol/l?

在ph為8左右的溶液中,dna分子是帶負電荷的,加一定濃度的naac或nacl,使na+中和dna分子上的負電荷,減少dna分子之間的同性電荷相斥力,易於互相聚合而形成dna鈉鹽沉澱,當加入的鹽溶液濃度太低時,只有部分dna形成dna鈉鹽而聚合,這樣就造成dna沉澱不完全,當加入的鹽溶液濃度太高時,其效果也不好。在沉澱的dna中,由於過多的鹽雜質存在,影響dna的酶切等反應,必須要進行洗滌或重沉澱。

2樓:瀟vs逍

用無水乙醇沉澱dna,這是實驗中最常用的沉澱dna的方法。乙醇的優點是可以任意比和水相混溶,乙醇與核酸不會起任何化學反應,對dna很安全,因此是理想的沉澱劑。

dna溶液是dna以水合狀態穩定存在,當加入乙醇時,乙醇會奪去dna周圍的水分子,使dna失水而易於聚合。一般實驗中,是加2倍體積的無水乙醇與dna相混合,其乙醇的最終含量佔67%左右。因而也可改用95%乙醇來替代無水乙醇(因為無水乙醇的**遠遠比95%乙醇昂貴)。

但是加95%的乙醇使總體積增大,而dna在溶液中有一定程度的溶解,因而dna損失也增大,尤其用多次乙醇沉澱時,就會影響收得率。折中的做法是初次沉澱dna時可用95%乙醇代替無水乙酵,最後的沉澱步驟要使用無水乙醇。也可以用0.

6倍體積的異丙醇選擇性沉澱dna。一般在室溫下放置15-30分鐘即可。

3樓:道峰山營

因為dna溶液是dna以水合狀態穩定存在,當加入乙醇時,乙醇會奪去dna周圍的水分子,使dna失水而易於聚合。

脫氧核糖核酸(英語:deoxyribonucleic acid,縮寫為dna)又稱去氧核糖核酸,是一種分子,雙鏈結構,由脫氧核糖核苷酸(成分為:脫氧核糖及四種含氮鹼基)組成。

可組成遺傳指令,引導生物發育與生命機能運作。

主要功能是長期性的資訊儲存,可比喻為「藍圖」或「食譜」。其中包含的指令,是建構細胞內其他的化合物,如蛋白質與rna所需。

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