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sec 是液相色譜的一種主要分離模式,誰家實驗室李還沒有一襪鋒虛個sec,為了大家更好地使用sec,今天小析就和大家一起看一看sec的原理、實驗條件選擇、應用、常見問題及基穗解決辦法,我們一起分享學習。
體積排阻色譜法 (sec) 近年來被廣泛地應用在各個行業,是研究分子量及分子量分佈測試、研究聚合物分子結構,揭示聚合物類樣品物理效能的重要錶針手段。在聚合物類產品質量的控制、合成工藝的改進過程中發揮著積極作用。
體積排阻色譜的定義。
排阻色譜法(size exclusion chromatography,sec)是一種根據試樣分告燃子的尺寸進行分離的色譜技術。又稱為凝膠色譜法、分子排阻色譜法、尺寸排阻色譜法等,是液相色譜的一種。
體積排阻色譜的分類。
1、凝膠過濾色譜法-gfc
一般用於分離水溶性的大分子,凝膠的代表是葡萄糖系列,洗脫溶劑主要是水。
2、凝膠滲透色譜法-gpc
主要用於有機溶劑中可溶的高聚物相對分子質量分佈分析及分離,常用的凝膠為交聯聚苯乙烯凝膠,洗脫溶劑為四氫呋喃等有機溶劑。
2樓:瑩一大小姐
排阻色譜的分離機理是立體排阻,樣品組分與固定相之間不存在相互作用的現象。色譜柱的填料是凝膠,它是一種表面惰性,含有許多不同尺寸的孔穴或立體網狀物質。凝膠的孔穴大小與如埋謹被分離的試樣大小相當。
僅允許直徑小於孔開度的組分分子進入,這些孔對於流動相分子來說是相當大的,以致流動相分子可以自由地擴散出人。對不同大小的組分分子,可分別滲入到凝膠孔內的不同深度,大個的組分分子可以滲入到凝膠的大孔內,但進不了小孔,甚至於完全被排斥。小個的組分分子,大孔小孔都可以滲進去,甚至進入很深,一時不易洗脫出來。
因此,大的組分分子在色譜柱中停留時間較短,很快被洗出,它的洗脫體積(即保留時間)很小。小的組分分子在色譜柱中停留時間較長,洗脫體積卿保留時間)較大,直到所有孔內的最小分子到達柱出口,這種按分子大小而分離的洗脫渣基過程才告完成。 因為分子尺寸一般隨分子量的增加而增大,所以根據分子量表達分子尺寸比較方便。
將因分子過大而不能部分地進入液掘某一給走固定相孔內的最小的樣品粒子的分子量,定義為該固定相的排阻極限。
對於分子排阻色譜法說法正確的是()。
3樓:昝唐
對於分子排阻色譜法說法正確的是()。
a.小分子將滲入全部細孔中,經歷的擴散路程最長。
b.大分子完全被排斥在孔外,經歷的路程最短。
c.中冊含等大小分子則滲入部分較大的孔隙,而被較小孔隙排斥,經歷御消的路程居中。
d.小分子先流出。
正鎮姿知確答案:abc
分子排阻色譜法的分離原理是
4樓:考試資料網
答案】:e分子排阻談爛乎色譜法的分離原理是凝膠色譜柱的分子篩機制。分子排阻色譜法是根據含悉歷態待測組分的分子大小進行分離的一種液相色譜基數。
空間排阻色譜根據物質哪種差異達到分離
5樓:齊通
空間排阻色譜根據物質哪種差異達到分離:分子大小差異 。
空間排阻色譜法又名尺寸排阻色譜法(size exclusion chromatography,sec),是按分子大小順序進行分離的一種色譜方法。
被廣泛應用於大分子分級,即用來分析大分子物質相對分子質量的分佈。
其固定相為化學惰性多孔物質——凝膠談卜或,凝膠具有一定大小的孔穴,體積大的分子不能滲透到孔穴中去而被排阻,較早的淋洗出來;中等體積的分子部分滲透;小分子可完全滲透入內,最後洗出色譜柱。這樣,樣品分子基本弊衡按其分子大小先後排阻,從柱中流出。
空間排阻色譜法以凝膠(gel)為固定相。它類似於分子篩的作用,但凝膠的孔徑比分子篩要大得多,一般為數奈米到數百奈米。溶質在兩相之間不是靠其相互作用力的不同來進行分離,而是按分子大小進行分離。
分離只與凝膠的孔徑分佈和溶質的流動力學體積或分子大小有關。試樣進入色譜柱後,隨流動相在凝膠外部間隙以及孔穴旁流過。
在試樣中一些太大的分子不能進入膠孔而受到排阻,因此就直接通過柱子,首先在色譜圖上出現,一些很小的分子可以進入所有膠孔並滲透到顆粒中,這些組分在柱上的保留值最大。
在色譜圖上最後出現。高含伍效液相色譜儀主要有進樣系統、輸液系統、分離系統、檢測系統和資料處理系統,下面將分別敘述其各自的組成與特點。
分子排阻色譜法的適用範圍
6樓:彼岸之戀
適用範圍:適用於對未知樣品的探索分離,它能很快提供樣品按分子大小組成的全面情況,並迅速判斷樣品是簡單的還是複雜的混合合物,並提供樣品中各組分的近似分子量。這種分離方法不宜用於分子大小組成相似或分子大小僅差10%的組分分析,如同分異構體的分離不宜用分子排阻色譜法。
分子排阻色譜法的介紹
7樓:眾神風逝
分子排阻色譜法又稱空間排阻色譜法(sec)是利用多孔凝膠固定相的獨特性產生的一種,主要根據凝膠孔隙的孔徑大小與高分子樣品分子的線團尺寸間的相對關係而對溶質進行分離的分析的方法。分子排阻色譜又叫凝膠色譜法。
用高效液相色譜法怎麼算的樣品濃度
含量 濃度x稀釋倍數 供試品稱樣量 x100 首先確定樣品成分,獲取該成分的純品 對照品 將對照品溶液配製成與樣品成分濃度相當的濃度 比如樣品濃度是10mg ml左右,對照品溶液就配製成10mg ml 對照品溶液和供試品溶液分別進樣,進行色譜分析,獲得對照品成分峰面積與供試品溶液峰面積 此時已知對照...
高效液相色譜法的原理與適用範圍及取樣要求
高效液相色譜法是在經典色譜法的基礎上,引用了氣相色譜的理論,在技術上,流動相改為高壓輸送 最高輸送壓力可達4.9 107pa 色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成,從而使柱效大大高於經典液相色譜 每米塔板數可達幾萬或幾十萬 同時柱後連有高靈敏度的檢測器,可對流出物進行連續檢測。特點 1 高壓 ...
高效液相色譜法標準溶液配製為什麼要用流動相稀釋
用流動相稀釋樣品主要是為了提高分離度,增加理論塔板數,使峰形尖銳,對稱。具體理由如下 色譜法的實質是樣品在流動相與固定相之間反覆分配的過程,這個過程在實際中會受到很多因素的影響從而造成分離度下降,理論塔板數降低,使得分離不理想.根據液相色譜van deemter方程h a c a為渦流擴散係數,c為...