哪裡能檢測蛋白質糖基化,蛋白質在哪裡進行糖基化

時間 2022-06-29 11:35:08

1樓:匿名使用者

蛋白質的糖基化

糖蛋白在細胞內部,細胞膜和細胞外均有發現,實際上大部分蛋白質是糖蛋白。對糖蛋白的檢測和分析發現,糖蛋白中糖組分的結構和功能具有多樣性。糖蛋白中的糖通常是不同種類的,而且是由一些可控數量的單糖組成。

糖基化的多樣性與細胞週期,細胞分化和發展的狀態有關。在蛋白組時代中,蛋白質的修飾會引起其理化性質的改變,因此是不容忽視的。

從1d或2d凝膠得到的糖基化蛋白的識別,一般是進行maldi-ms指紋分析, 或是對maldi-pad或esi-ms/ms得到的碎片譜進行分析。對完整的糖蛋白的研究是非常困難的,所有已知的離子化技術都有其侷限性。目前,人們主要研究糖肽,其好處之一就是質量減小了,這就會得到更好的解析度,而且糖肽仍保留了糖基化位點。

將分離的糖蛋白用不同的蛋白酶消化後就可進行糖肽的研究。一旦糖肽被識別出,就可以用串連質譜(esi-ms/ms)來闡明肽序列。當蛋白的序列已知時,計算質量差就可推出其上附著的寡糖的質量。

要將糖部分從糖蛋白中釋放出來,可用化學切割或酶切割。目前,連有結構專一性糖苷酶的質譜在提供序列,分支和連結資料方面是最有力的技術。對於n糖基化常用的糖苷內切酶有pngase-f, pngase-a, endof和endoh。

化學切割也可以用來釋放o-連線和n-連線的多糖,但經常出現的缺點是他會完全破壞所有的肽鍵,因而丟失了關於糖附著位點的資訊。而且這些切割不能從糖肽中連續釋放單糖。用肼的化學切割可以除去兩種型別的糖基化。

在60℃可專一性的釋放o-連線的糖,而在95℃能釋放n-連線的糖。釋放o-原子更常用的方法是用鹼進行β消除。通常,糖基中加入金屬離子在maldi和esi中離子化。

用maldi-ms分析糖類的一個好的選擇是將之與其他一些化合物混合,這樣可以進一步提高靈敏度和解析度。不同的質譜方法可以產生多糖的源後裂解(psd)和碰撞誘導解離 (cid)譜,這可以給出有關糖的序列,分支及糖間的連線等資訊。

2樓:匿名使用者

包括糖基化、羥基化、醯基化、二硫鍵形成等,其中最主要的是糖基化,幾乎所有內質網上合成的蛋白質最終被糖基化。糖基化的作用是: ①使蛋白質能夠抵抗消化酶的作用;②賦予蛋白質傳導訊號的功能;③某些蛋白只有在糖基化之後才能正確摺疊。

3樓:匿名使用者

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4樓:johnny王子

不清楚,不過我們組一剛來的老師是糖生物學專家.開學給你問問

蛋白質在**進行糖基化

5樓:匿名使用者

在內質網。糖基化是在酶的控制下,蛋白質或脂質附加上糖類的過程,發生於內質網。在糖基轉移酶作用下將糖轉移至蛋白質和蛋白質上的氨基酸殘基形成糖苷鍵。

蛋白質經過糖基化作用,形成糖蛋白。糖基化是對蛋白的重要的修飾作用,有調節蛋白質功能作用。

如何分析蛋白質的糖基化位點以及糖基化後的分子量,****

6樓:匿名使用者

要分析蛋白質的糖基化位點以及糖基化後的分子量首先需要知道該蛋白質的氨基酸序列

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只需要提交蛋白序列,就可以分析出該蛋白質的糖基化位點以及糖基化後的分子量

什麼是蛋白質糖基化

7樓:母昌壘母昌壘

蛋白質的糖基化是指在糖基轉移酶作用下將糖轉移至蛋白質,和蛋白質上的氨基酸殘基形成糖苷鍵的過程。糖基化是對蛋白的重要的修飾作用,有調節蛋白質功能作用。具體過程:

n-連線的糖鏈合成起始於內質網,完成與高爾基體。在內質網形成的糖蛋白具有相似的糖鏈,由cis面進入高爾基體後,在各膜囊之間的轉運過程中,發生了一系列有序的加工和修飾,原來糖鏈中的大部分甘露糖被切除,但又被多種糖基轉移酶依次加上了不同型別的糖分子,形成了結構各異的寡糖鏈。糖蛋白的空間結構決定了它可以和那一種糖基轉移酶結合,發生特定的糖基化修飾。

許多糖蛋白同時具有n-連線的糖鏈和o-連線的糖鏈。o-連線的糖基化在高爾基體中進行,通常的一個連線上去的糖單元是n-乙醯半乳糖,連線的部位為ser、thr和hyp的oh基團,然後逐次將糖基轉移到上去形成寡糖鏈,糖的供體同樣為核苷糖,如udp-半乳糖。糖基化的結果使不同的蛋白質打上不同的標記,改變多肽的構象和增加蛋白質的穩定性。

在高爾基體上還可以將一至多個氨基聚糖鏈通過木糖安裝在核心蛋白的絲氨酸殘基上,形成蛋白聚糖。這類蛋白有些被分泌到細胞外形成細胞外基質或粘液層,有些錨定在膜上。

糖基化對蛋白質的性質和功能有何影響?

8樓:清溪看世界

糖基化過程使用的糖有單糖和多糖,單糖本身還原性較強,能提高美拉德反應的程序,與蛋白質共價連結較為充分。在蛋白質形成凝膠體系過程中,單糖等還原糖的存在能顯著縮短凝膠形成的時間,降低凝膠形成所需濃度。

多糖與蛋白質發生糖基化的機理尚沒有完全掌握,且多糖沒有還原性,反應過程較單糖緩慢,但蛋白質與多糖發生糖基化反應後,其凝膠強度提升要遠遠高於蛋白質本身凝膠強度,也高於單糖糖基化體系。

9樓:俱懷逸興壯思飛欲上青天攬明月

①使蛋白質的溶解度發生變化。糖基化往往使蛋白質在水中的溶解度增大。但是,若糖鏈增長到一定程度,由於相對分子質量增大和形成高階結構,亦會出現憎水性增加的現象。

②使中性電解質帶電荷。氨基糖解離後,應帶正電荷。但是,天然存在的氨基糖的氨基都被n-乙醯基取代,實際上相當於中性糖。

許多糖鏈上有唾液酸,或糖醛酸,解離後帶負電荷。所以,糖基化可能使蛋白質增加許多負電荷。

糖基化是在酶的控制下,蛋白質或脂質附加上糖類的過程,發生於內質網。在糖基轉移酶作用下將糖轉移至蛋白質,和蛋白質上的氨基酸殘基形成糖苷鍵。蛋白質經過糖基化作用,形成糖蛋白。

糖基化是對蛋白的重要的修飾作用,有調節蛋白質功能作用。

10樓:匿名使用者

糖基化是在酶的控制下,蛋白質或脂質附加上糖類的過程。此過程為四中共轉移(co-translational)與後轉移修飾的步驟之一,發生於內質網。蛋白質經過糖基化作用之後,可形成糖蛋白。

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